局部注射对腰突症大鼠脊髓和背根节中P物质及降钙素基因相关肽影响的实验研究

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目的:以免疫学说为基础,选用自体髓核移植模型SD大鼠为对象,通过检测L4-6节段脊髓及背根神经节内SP及CGRP的含量变化,探讨得宝松、鹿瓜多肽注射液治疗PLID疼痛的作用机理。  方法:选用SPF级SD大鼠45只,体重180~220g,雌雄各半。随机分为五组,即:空白组、模型组、假手术组、西药组、中药组,每组9只。适应性喂养一周后手术制作自体髓核移植大鼠模型。术后第三天开始局部注射给药(即模型组和假手术组给予128.25μL生理盐水,西药组给予得宝松13.5μL+2%利多卡因注射液67.5μL,中药组给予鹿瓜多肽注射液108μL+2%利多卡因注射液67.5μL),造模后第3、7、12天各一次。末次给药12小时后处死。取 L4-6阶段脊髓及背根神经节,采用免疫荧光染色方法测定两种组织中SP及CGRP的含量。  结果:各组大鼠脊髓 SP、CGRP平均荧光强度比较,差异有统计学意义(SP:F=89.894,p=0.000;CGRP:F=39.085,p=0.000),进一步两两比较模型组与空白组、假手术组相比较,实验性 PLID大鼠脊髓中 SP和CGRP含量显著性增高(p=0.000<0.01),证明模型复制可靠;西药组与模型组、假手术组相比较,实验性 PLID大鼠脊髓中 SP和CGRP含量显著性降低(p=0.000<0.01),西药组与中药组相比较,实验性 PLID大鼠脊髓中 SP含量显著性降低(p=0.000<0.01),西药组与中药组相比较,实验性 PLID大鼠脊髓中 CGRP含量降低(p=0.039<0.05)。中药组与模型组相比较,实验性 PLID大鼠脊髓中 SP和CGRP含量显著性降低(p=0.000<0.01),中药组与假手术组相比较,实验性 PLID大鼠脊髓中 SP含量显著性降低(p=0.002<0.01),CGRP含量降低(p=0.02<0.05)。各组大鼠 DRG中SP、CGRP平均荧光强度比较,差异有统计学意义(SP:F=132.951,p=0.000;CGRP:F=104.442,p=0.000),进一步两两比较模型组与空白组、假手术组相比较,实验性 PLID大鼠 DRG中SP和CGRP含量显著性增高(p=0.000<0.01),证明模型复制可靠;西药组与模型组、假手术组相比较,实验性 PLID大鼠 DRG中SP和CGRP含量均显著性降低(p=0.000<0.01),西药组与中药组相比较,实验性 PLID大鼠 DRG中 SP含量显著性降低(p=0.000<0.01),CGRP含量降低(p=0.024<0.05)。中药组与模型组相比较,实验性 PLID大鼠 DRG中SP和CGRP含量均显著性降低(p=0.000<0.01),中药组与假手术组相比较,实验性 PLID大鼠 DRG中 SP含量显著性降低(p=0.000<0.01),CGRP含量显著性降低(p=0.001<0.01)。  结论:①中药鹿瓜多肽注射液能够降低实验性 PLID大鼠脊髓和背根神经节中SP和CGRP含量显著性降低(p=0.000<0.01),提示中药鹿瓜多肽治疗 PLID的作用机理,可能通过抑制背根神经节神经元合成和分泌 SP,清除背根神经节中SP和CGRP,减少其向脊髓中的传递,从而抑制和缓解疼痛;  ②鹿瓜多肽注射液局部注射治疗 PLID作用较得宝松注射液效果稍差,其对CGRP降低作用不甚显著,CGRP可扩张血管,改善局部组织的血液循环,其促进病变组织修复的作用可能大于参与传递疼痛的作用,中药活血化瘀法治疗PLID,可能是提升了CGRP这方面的功能而达到了治疗作用。  ③CGRP荧光染色阳性细胞数目明显多于SP,提示两周后神经元细胞对CGRP的分泌明显多于SP的分泌。  ④SP荧光染色结果显示,神经元细胞中SP明显少,而其他部分SP着色相对较多,说明当急性刺激DRG时,神经元细胞激惹,迅速分泌SP,引起剧烈疼痛,随着时间推移,DRG分泌 SP减少,锐痛首先缓解。
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