月桂酰基苹果酸酯毛细管胶束电动色谱在中药分析中的应用研究

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胶束毛细管电动色谱(MEKC)是一种基于毛细管区带电泳和胶束增溶相结合的分析技术,具有同时分离带电粒子及中性分子的能力,使得MEKC在生物、化学、医药、环保、食品等领域中获得了广泛的应用。本文阐述了胶束毛细管电动色谱在中药领域的应用情况,主要利用月桂酰基苹果酸酯为表面活性剂,在研究和建立新的中药分析方法方面做了以下研究工作:1.对比测试了月桂酰基苹果酸酯、月桂酰基柠檬酸酯、月桂酰磺基水杨酸酯、月桂酰基谷氨酸4种带有不同基团的月桂酰基表面活性剂的MEKC性能,发现月桂酰基苹果酸酯的MEKC性能最好,进而探讨了碳链长度(C10、C12、C14、C16)对酰基苹果酸酯表面活性剂MEKC性能的影响,发现月桂酰基(C12)苹果酸酯的MEKC性能最好。为此,建立了基于月桂酰基苹果酸酯为表面活性剂的MEKC法同时测定不同厂家咳喘宁片剂中麻黄碱、伪麻黄碱、吗啡、磷酸可待因、苦杏仁苷、甘草苷、芹菜素、甘草次酸8种有效成分的分析方法。在未涂层弹性石英毛细管(45cm×50μm)为分离通道,20mmol·L-1月桂酰基苹果酸酯-20mmol·L-1Tris(含13%异丙醇、9%乙腈,pH=8.0)为运行缓冲液的最佳分离条件下,8种被测组分在18min内达到完全的基线分离,各组分的检出限分别为0.80、0.80、0.30、0.30、0.60、0.40、0.30、1.0mg·L-1,样品的加样回收率在95.7%-106%之间。该方法分析速度快、分离效率高,已成功用于实际样品的分析。2.分别采用紫外二极管阵列检测器(UV-DAD)和质谱检测器(ESI-MS),建立MEKC法同时测定牛黄上清片中的黄连碱、小糪碱、药根碱、黄柏碱和川芎嗪5种主要生物碱成分的新方法。在MEKC-UV方法中,5种成分可以在5min内实现基线的完全分离。该方法分析速度快,特别适合于质量控制样品的快速测定。在MEKC-ESI-MS方法中,5种成分在月桂酰基苹果酸酯的较低浓度(7.5mmol·L-1)下,18min内达到基线的完全分离,各组分的检出限为0.20、0.090、0.12、0.60、0.90mg·L-1,样品的加样回收率在96.0%~105%之间。该方法虽然分析时间较长,但MS的定性能力强,可用于较复杂的未知样品的分析。3.建立了微乳毛细管电动色谱(MEEKC)法同时测定中药感冒制剂中麻黄碱、伪麻黄碱、连翘苷、苦杏仁苷、绿原酸、木犀草素、咖啡酸7种药效成分的分析方法。实验考察了微乳液组成、pH等因素对分离的影响,发现在12mmol·L-1月桂酰基苹果酸酯-8mmol·L-1硼砂(含8%异丙醇、1.5%正己烷,pH=7.5)条件下,7种组分可在12min内得到完全的基线分离,各组分的检出限分别为0.20、0.20、0.50、0.40、0.30、0.20、0.20mg·L-1,样品的加样回收率在93.6%~106%之间。该方法简便、高效、快速,可以用于中药感冒制剂有效成分的分析。
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