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目的：研究加味四逆散对慢性疲劳综合征(CFS)模型造模过程中小鼠行为学、肝脏、肌肉和肾上腺病理学、大脑额叶皮层、海马线粒体和血清 IL-2 的影响。
方法：将 70 只昆明种小鼠,雌性,体重 17-22g,适应性饲养 2 天后以随机数字表法分为对照组、模型组、加味四逆散大剂量组、加味四逆散小剂量组、人参组、盐酸帕罗西汀组。除对照组外各组小鼠均接受46 天各种不同的应激,包括电针(疏密波,以小鼠能耐受为度,一次 10秒,每只 5 次)、强迫游泳(19℃,水深 40cm,小鼠力竭为止),滚筒(60转/分钟,每组 10 分钟)、悬尾(从每组 10 分钟开始,渐次延长)。各组小鼠每 3 天称体重,每 7 天以 Open-Field 法测定动物行为学的变化。造模结束后,以随机数字表法选取造模组 3 只,对照组 2 只做电镜切片和石蜡切片,其余各组小鼠饲养 4 天后,进行药物治疗。加味四逆散小剂量组以 8.64g 原药溶于 10ml 生理盐水,每 10g 体重小鼠灌胃 0.1ml；加味四逆散大剂量组以 25.91g 原药溶于 20ml 生理盐水,每 10g 体重小鼠灌胃 0.2ml；人参组以 5g 人参颗粒溶于 38.5ml 生理盐水,每 10g 体重小鼠灌胃 0.1ml；盐酸帕罗西汀组以 20mg 盐酸帕罗西汀片溶于 77ml 生理盐水中,每 10g 体重小鼠灌胃 0.1ml；对照组和模型组每 10g 体重小鼠灌胃0.1ml 生理盐水,共治疗 7 天。实验动物于末次给药后禁食,不禁水,次日取材。制作大脑左侧额叶皮层、海马电镜切片；制作肝脏、肌肉和肾上腺石蜡切片；以小鼠 IL-2ELISA 试剂盒测定血清 IL-2 含量。
结果：与模型各组比,造模前对照组体重低于加味四逆散小剂量组和人参组,且差异有统计学意义(P<0.05)；造模后对照组小鼠体重高于造模各组,且差异有统计学意义(P<0.05)；造模前对照组小鼠 Open-Field评分低于造模各组,但无统计学差异(P>0.05) ,造模后对照组小鼠Open-Field 评分高于造模各组,且差异有统计学意义(P<0.05)。治疗第 1天与第 3 天,对照组与模型组小鼠体重差异有统计学意义(P<0.05)。治疗第 7 天各组小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。造模第 1 天,对照组和模型 组 小 鼠与 其 余各 组 比 较, Open-Field 评 分差 异 无统 计 学 意 义(P>0.05)。造模第 20 天,加味四逆散大剂量组、加味四逆散小剂量组、人参组、盐酸帕罗西汀组小鼠水平评分与对照组比较差异显著,且有统计学意义(P<0.05)。造模第 28 天,人参组、盐酸帕罗西汀组小鼠水平运动评分与对照组比较统计学差异显著(P<0.01)；加味四逆散小剂量组水平运动评分与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)；模型组、人参组、盐酸帕罗西汀组小鼠垂直运动评分低于对照组,且有统计学意义(P<0.05)。造模第 38 天,模型组、加味四逆散大剂量组、加味四逆散小剂量组、盐酸帕罗西汀组小鼠垂直评分低于对照组,且有统计学意义(P<0.05)。治疗结束后,加味四逆散大剂量组小鼠水平评分高于模型组,且统计学差异显著(P<0.001)；加味四逆散小剂量组小鼠水平评分高于模型组,且有统计学意义(P<0.05)。
模型组、加味四逆散大剂量组、加味四逆散小剂量组、人参组、盐酸帕罗西汀组小鼠 IL-2 含量高于对照组,且有统计学意义(P<0.05)。加味四逆散大剂量组、人参组、盐酸帕罗西汀组小鼠 IL-2 含量低于模型组,且有统计学意义(P<0.05, P<0.01)。
小鼠额叶和海马 CA1 区电镜观察：CFS 模型小鼠额叶和海马 CA1 区细胞内出现线粒体外膜损伤、嵴水肿、数目增多等线粒体损伤的表现。加味四逆散大剂量治疗组小鼠海马 CA1 区线粒体膜清晰,线粒体嵴清晰可见。
光镜观察：CFS 模型小鼠肝细胞排列疏松,部分肝细胞水肿或肝细胞坏死。加味四逆散大剂量治疗组肝细胞排列紧密,肝索明显可见,肝细胞核清晰可见,细胞质着色明显。CFS 模型小鼠肌束排列不均,多处肌纤维束碎裂消失。加味四逆散大、小剂量组小鼠束排列紧密,细胞核位于膜内,肌束较粗,肌横纹可见。CFS 模型小鼠肾上腺球状带细胞核增大且深染,束状带组织内空泡增多。加味四逆散大剂量治疗组肾上腺细胞排列紧密,球状带细胞核聚集且存在少许空泡,束状带细胞体积较大,胞质染色相对较浅。
结论：慢性不可预见的中高等强度应激能诱导慢性疲劳综合征模型,小鼠在造模过程中体重降低；模型小鼠的水平运动能力和垂直运动能力下降。加味四逆散可提高 CFS 模型小鼠运动能力,对慢性疲劳综合征治疗有效；加味四逆散治疗慢性疲劳综合征的机理可能与保护 CFS 模型小鼠海马 CA1 区线粒体、肝细胞、肌肉细胞、肾上腺球状带和束状带的损伤和降低 CFS 模型小鼠血清 IL-2 的含量有关。