葡萄果皮和叶片白藜芦醇及其糖苷的测定方法、构成特点及诱导子对其含量的影响

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hantao2007
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为了优化葡萄果皮和叶片中白藜芦醇及其糖苷的提取条件,本研究通过一个L36(6)5的正交实验设计,用紫外线UV-C照射后的葡萄‘北全’果皮和叶片作为试验材料,对影响葡萄果皮和叶片的提取条件的因素,包括提取溶剂、提取时间、料液比和提取温度,进行了优化。在果皮和叶片中提取芪类物质的影响因素中,溶剂是最重要的因素。在本研究中,首次用了甲醇和乙酸乙酯50∶50(v/v)的混合溶液,它的提取效率是最高的。对于19果皮和叶片而言,用10mL甲醇和乙酸乙酯50∶50(v/v)的混合溶液在黑暗中25℃提取24小时。优化的色谱分离条件是:检测温度为30℃,用乙腈(A)和水(B)作为流动相梯度洗脱,流速为1mL/min,在0分钟时,A相为10%,在5分钟时,A相为17%,在12分钟时,A相为18%,在22分钟时,A相为22%,在30分钟时,A相为33%,在45分钟时,A相为38%,在58分钟时,A相为100%,然后冲洗平衡柱子到初始状态。   利用高效液相色谱技术,研究了103个不同基因型葡萄果皮和叶片中白藜芦醇及其糖苷的含量特点及果皮和叶片中的他们含量的相关性。葡萄果皮和叶片中的芪类物质的含量与遗传背景密切相关。种间杂交的砧木品种和野生品种的芪类物质含量显著高于栽培品种,并发现了几个高含量的种质。栽培品种果皮的芪类化合物含量较低,通常含量都低于30μg·g-1FW。叶片中芪类物质的含量显著低于果皮中的含量;砧木品种也显著高于栽培品种。葡萄果皮和叶片中顺式-白藜芦醇糖苷是主要芪类化合物。反式-白藜芦醇在葡萄果皮和叶片中不是主要的芪类物质存在形式。在自然条件下都检测不到顺式-白藜芦醇。果皮和叶片中的芪类物质含量没有显著的相关性。   利用CaCl2、EGTA、ASA和SA的溶液浸泡后,再用紫外线UV-C照射过的北全转熟期的葡萄果粒,研究了这些信号分子对反式-白藜芦醇的含量的影响。紫外线能显著提高果皮中反式-白藜芦醇的含量,且在紫外线处理48小时后就能达到比较高的水平。CaCl2、EGTA、ASA和SA的溶液浸泡后的UV-C照射过的葡萄果皮,都能显著促进UV-C提高反式-白藜芦醇的含量。
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