目的：　　1.了解住院患者中铜绿假单胞菌感染的临床分布特点及耐药特性，为临床抗菌药物的合理选择提供依据。　　2.分析住院患者中多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)的耐药现状，探讨MDRPA感染的危险因素，为预防MDRPA感染提供科学依据。　　3.研究铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物的耐药机制，为控制耐药性的传播提供依据。　　方法：　　1.回顾性调查2007～2009年住院患者中铜绿假单胞菌感染的标本来源、临床科室及患者年龄分布特点，并分析铜绿假单胞菌的耐药性及变迁情况。　　2.回顾性调查2007～2009年住院患者中MDRPA和非MDRPA感染的药敏结果及其对各研究因素的暴露情况。对研究因素进行单因素x2检验和多因素非条件Logistic回归分析，找出MDRPA感染的独立危险因素。　　3.选取对环丙沙星不敏感的铜绿假单胞菌69株为受试株，PCR筛选质粒介导的喹诺酮类耐药基因(qnr，aac(6)-Ib-cr)，阳性产物进行DNA测序确定基因型，接合转移试验探讨耐药基因的转移性;同时用琼脂稀释法检测环丙沙星的最低抑菌浓度(MIC)，和加入羰基氢氯苯腙(CCCP)后的MIC值变化，以确定是否存在主动外排耐药机制。　　结果：　　1.本研究共分离出铜绿假单胞菌227株，其中痰标本占67.8％，其次为尿液、血液和脓液等;临床科室分布，以ICU占首位，然后依次是呼吸科和神经内科;全部感染者中，年龄最小＜1岁，最大为96岁，平均年龄为64土15岁，70岁以上的有83例，占36.6％。　　2.临床常用抗菌药物中，敏感性最好的为妥布霉素（敏感率为94.3％），其次为庆大霉素和头孢哌酮/舒巴坦（敏感率均在85％以上）。耐药率最高的为头孢唑啉（耐药率达99.7％），其次为呋喃妥因（耐药率为99.5％），氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明、头孢曲松均处于较高耐药水平（耐药率均在90％以上）。　　3.3年间227株铜绿假单胞菌对环丙沙星的耐药率分别为34.7％，31.3％，40.9％，对左氧氟沙星的耐药率分别为33.4％，32.4％，42.5％，说明近年来常用抗菌药物中，喹诺酮类药物的耐药性有明显上升趋势。　　4.MDRPA感染的独立危险因素有3项。按相对危险度大小依次为年龄＞50岁，≥2种抗菌药物使用＞7d，疾病危重程度。本次调查结果表明，吸氧是MDRPA感染的危险因素之一。　　5.69株铜绿假单胞菌受试株中，有12株aac(6)-Ib-cr基因阳性，阳性率为17.4％。全部阳性菌株经DNA测序、BLAST比对，有3株携带aac(6)-Ib-cr基因（含有Trp-102→Arg和Asp-179→Tyr突变），阳性率为25％;另有3株为aac(6)-Ib野生型。aac(6)-Ib-cr基因最早在2008年的标本中检出，质粒接合转移试验结果阴性。　　6.69株铜绿假单胞菌受试株中，未检出qnr基因，即未检出qnrA，qnrB，qnrC，qnrD，qnrS基因。　　7.69株铜绿假单胞菌受试株中，有47株细菌在加入CCCP后，MIC值降低≥4倍，即68.1％的MIC值被逆转。　　结论：　　1.本次调查表明，铜绿假单胞菌主要引起呼吸道感染;主要在ICU病区、呼吸内科及神经内科病区流行;＞60岁患者在所有铜绿假单胞菌感染者中所占比例较大，提示老年患者更易感染铜绿假单胞菌。　　2.227株铜绿假单胞菌仅对少数抗菌药物敏感性较高，对大多数抗菌药物有较高的耐药性，且喹诺酮类药物的耐药性有明显上升趋势。　　3.本次调查提示，年龄＞50岁、≥2种抗菌药物使用＞7d和疾病危重程度是MDRPA感染的独立危险因素。　　4.我院铜绿假单胞菌PMQR基因以aac(6)-Ib-cr基因为主，未检出qnr基因，且aac(6)-Ib-cr基因介导低水平耐药;铜绿假单胞菌在喹诺酮类药物中存在泵出机制，说明主动外排系统发挥了重要的耐药作用。