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特发性炎症性肌病是一种具体原因尚不明确的累及肌肉为主的疾病,病理特征主要表现为受累肌肉或其他组织的变性坏死以及大量免疫细胞的异常浸润,涉及到了细胞免疫和体液免疫以及其他非免疫因素和因子的活化以及参与。首选的主要治疗药物包括糖皮质激素和免疫抑制剂;由于治疗效果并不理想,且长时间的应用伴随较多甚至危重的副作用,因此需要积极探索确切的发病机制以及寻求治疗效果较理想并且副作用较小的药物。维生素D3的主要活性形式是1,25（OH）2D3,即骨化三醇。作为一种类固醇激素,其经典的作用是通过钙磷代谢的调节,从而维持机体骨骼的健康。近年来研究发现其具有神经内分泌激素作用,通过与细胞内的维生素D受体（VDR）结合,可从多方面多途径调节免疫功能和炎症防御。研究发现其缺乏与多种自身免疫性疾病的发生发展相关。活性维生素D3还能影响多种效应T细胞的功能:可抑制Th17细胞相关因子如IL-17和IL-6的表达;还可以诱导产生具有免疫抑制功能的Treg细胞,同时增加抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β的表达。我们前期的研究显示,改良实验性自身免疫性肌炎模型（EAM）较好的模拟了多发性肌炎的病理特点;该实验模型在造模开始到2周为小鼠肌炎的进展期,炎症程度在2周达到高峰后逐渐缓解;前期研究显示,促炎性Th17细胞和调节性Treg细胞的失衡及其相关的因子的变化与该疾病的发生发展有密切的关系。活性维生素D3对肌炎的发展过程是否有抑制作用,目前尚未有研究报道。目的:观察活性维生素D3对肌炎模型小鼠的进展期和持续期是否有抑制作用;若有作用,探讨活性维生素D3是否通过th17和treg细胞及其相关因子发挥作用;进一步与甲强龙的作用效果进行比较,为临床特发性炎症性肌病的治疗提供实验依据。方法:本实验分为两大组:2周处理组和4周处理组。2周处理组:balb/c小鼠随机分为5小组,每组5只,观察14天。正常对照组未进行任何处理;模型组采用eam模型处理;活性维生素D3干预组造模同时给予活性维生素D3腹腔注射;甲强龙干预组造模同时给予甲强龙腹腔注射;联合干预组造模同时给予甲强龙和活性维生素D3腹腔注射。4周处理组:分组同上,干预时间从造模第15天开始,干预方法同上,28天时观察。每组小鼠均进行一般状况观察、肌力评估和组织病理学评分;采用实时荧光定量pcr检测各组小鼠肌肉、淋巴结和脾脏中th17细胞相关因子il-17、il-6、il-23和treg细胞及其相关因子il-10、tgf-β和foxp3mrna的表达水平;采用luminex液相芯片技术检测各组小鼠血清中相关细胞因子il-17、il-6和il-23的表达水平。结果:1.与模型组比较,三种干预小鼠的肌力和肌肉组织的炎症程度（病理学分值）无论在2周或4周均有所改善。改善程度由弱到强顺序是骨化三醇组、甲强龙组、联合干预组。虽然2周联合干预的小鼠肌力和病理学得分好于甲强龙组,但没有统计学差异（p>0.05）;但4周联合干预的小鼠则显著好于甲强龙组（p<0.05）。2.小鼠肌肉和淋巴结组织中各因子的mrna表达水平:与模型组相比,骨化三醇干预后,在2周和4周都可以减少th17细胞相关因子il-6、il-17和il-23的表达,有统计学差异（p<0.05）;甲强龙和联合干预后更加降低了上述因子的表达,但两组间无统计学差异（p>0.05）。与模型组相比,在2周时骨化三醇干预的foxp3和IL-10的表达水平在炎性肌肉中增加,而TGF-β的表达降低;甲强龙和联合干预组IL-10表达继续依次增加并且在两组间有统计学差异（P<0.05）。与模型组相比在4周时,骨化三醇干预后Foxp3和TGF-β表达在淋巴结中增加;在甲强龙和联合干预后TGF-β表达依次显著增加,两组间有统计学差异（P<0.05）。3.小鼠脾脏组织中各因子的mRNA表达水平:与模型组相比,骨化三醇干预组在2周时Th17细胞相关因子IL-17和IL-23的表达增加,而IL-6的表达减低;Foxp3、IL-10和TGF-β的表达均增加,两组间有统计学差异。与模型组比较,甲强龙和联合干预后的IL-17表达增加;IL-10以及TGF-β表达明显增加且两组间有统计学差异。4周处理的各组中,与模型组比较骨化三醇干预后IL-6、IL-23的表达减低,IL-17的表达增加,两组间有统计学差异;而在甲强龙组和联合干预组中,IL-6表达降低且有统计学差异。三组干预后的Foxp3的表达依次减低,IL-10和TGF-β表达逐渐增加;三组间无统计学差异。4.在小鼠血清中,骨化三醇干预后IL-17、IL-6和IL-23的表达降低。正常组三种因子的表达微量,模型组中三种因子的表达升高;而给予干预处理后该三种因子的表达相继降低,与肌肉中的变化趋势较一致,并且三组间有统计学差异（P<0.05）。结论:1.无论是在进展期还是在持续期,骨化三醇干预后的肌炎模型小鼠的一般状况、肌肉炎性浸润程度都有所好转;虽然改善程度不如甲强龙,但骨化三醇联合甲强龙干预后的作用效果最好。2.骨化三醇大致降低炎症肌肉组织中IL-17、IL-6和IL-23mRNA的表达水平,增加Foxp3、IL-10和TGF-βmRNA的表达水平,通过作用于Th17/Treg细胞相关因子来发挥免疫调节作用,减轻小鼠机体特别是肌肉组织的炎性浸润程度,从而改善小鼠的肌力和一般状况。3.与甲强龙组比较,联合干预后脾脏组织中Th17细胞相关因子的表达无明显变化,而IL-10和TGF-βmRNA的表达水平明显增加;提示骨化三醇是可能主要通过促进IL-10和TGF-β的表达而增强对肌炎小鼠的炎症抑制作用。