Rhodosporidium paludigenum对青霉菌引起的果实采后病害的抑制及对棒曲霉素的降解作用研究

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果实采后腐烂作为一个全球性的问题,可导致巨大的经济损失和资源浪费,这在发展中国家尤为突出。霉菌是引发果实采后腐烂的主要因素之一,且霉菌在侵染果实过程中分泌真菌毒素,如水果及其制品中最常见的真菌毒素棒曲霉素等,给人类健康带来危害。通过控制果实腐烂是降低真菌毒素对果实污染的主要手段。红冬孢酵母(Rhodosporidium paludigenum)能有效控制冬枣、小番茄等水果的采后病害,是具有潜质的生物拮抗剂。然而,其单独应用的生防效力和化学杀菌剂相比还有一定差距,且尚不清楚该酵母在其他种类的水果上的生防效果。本论文拟通过R. paludigenum与其他安全的化学物质结合以提高其对柑橘、苹果、梨采后病害的抑制作用,并跟踪分析其对霉菌在果实上分泌棒曲霉素的影响;此外,研究R. paludigenum对棒曲霉素的降解作用,鉴定降解产物,评估降解产物的毒性,并探讨其相关的降解机制。主要研究结果如下:1. R. paludigenum能显著抑制柑橘采后绿霉病。将R. paludigenum结合碳酸氢钠处理早橘或椪柑,其抑制绿霉病的效果和化学杀菌剂维鲜等同。通过正交试验设计发现,R. paludigenum结合罗伦隐球酵母和粘红酵母,并以IBA、SA和SBC作为复合佐剂,能在实验条件下100%抑制柑橘绿霉病,其效力甚至高于化学杀菌剂。2. R. paludigenum对由扩展青霉引起的苹果和梨的采后青霉病也有显著的抑制作用。然而,酵母处理却诱导了扩展青霉在果实上分泌更多的棒曲霉素。3.通过调查发现棒曲霉素在我国市售的水果制品中的污染情况比较严重:在被检的62个样品中,棒曲霉素的检出率为56.5%,超标率(棒曲霉素含量大于50μg/L)为16.1%。环境的pH对棒曲霉素稳定性的影响比温度更大;棒曲霉素在pH值低于5的水相溶剂中比较稳定。棒曲霉素的最佳储存溶剂为乙腈。4. R. paludigenum能在体外去除棒曲霉素,在最优条件下(pH6.0,30℃)可在2天内几乎完全去除棒曲霉素;其作用机理包括物理吸附和酶解作用。R.paludigenum在苹果汁和梨汁中,也能发挥降解棒曲霉素的作用。5. R. paludigenum能分泌酶类降解棒曲霉素,该酶解作用是酵母自身的一种稳定特性,但棒曲霉素能诱导R. paludigenum分泌更多的降解相关酶类。降解相关的酶为胞内酶,该酶对氧气稳定,发挥作用时不需要辅助因子。6.通过HPLC-MS鉴定得到棒曲霉素的降解产物为desoxypatulinic acid;该产物的细菌毒性、植物毒性和细胞毒性均显著低于棒曲霉素。综上所述,R. paludigenum是极具潜质的生物拮抗剂。同时,R. paludigenum降解棒曲霉素的稳定特性,能为降低棒曲霉素的污染,保证食品安全提供新的途径和资源。本论文的研究结果为R. paludigenum的商业化应用奠定了基础。
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