腹腔复苏对失血性休克大鼠小肠粘膜保护作用的研究

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目的:探讨腹腔复苏对失血性休克大鼠小肠粘膜的保护作用。方法:健康雄性SD大鼠50只随机分为5组,分别为假手术组(Ⅰ组)、失血性休克组(Ⅱ组)、静脉复苏组(Ⅲ组)、静脉复苏加生理盐水腹腔复苏组(Ⅳ组)、静脉复苏加PD-2液腹腔复苏组(Ⅴ组),每组10只。Ⅰ组依次行右颈总动脉、右股静脉、左股动脉插管及全身肝素化;Ⅱ组在Ⅰ组基础上采用Wiggers改良法经左股动脉放血(平均动脉压降至40mmHg维持60min)制备失血性休克大鼠模型;Ⅲ组在Ⅱ组基础上于造模后经右股静脉补入放出的血量及2倍量林格氏液进行静脉复苏;Ⅳ组在Ⅲ组基础上同时腹腔内注入30ml生理盐水;Ⅴ组在Ⅲ组基础上同时腹腔内注入30ml 2.5%PD-2液。Ⅰ组大鼠经右颈总动脉、右股静脉、左股动脉插管及肝素化后120min取材(血及小肠标本)待测;Ⅱ组大鼠于造模后60min取材;Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ组大鼠于复苏后60 min取材。采用活性比色法测定血浆二胺氧化酶(diamineoxidase,DAO)活性,分光光度法测定血浆D-乳酸(D-lactic acid,D-LA)含量,比浊法测定血浆内毒素(endotoxin)含量,并在光镜及电镜下观察各组大鼠小肠粘膜组织学和亚细胞形态学变化。结果:血浆DAO活性、D-LA含量及内毒素含量,Ⅱ组较Ⅰ组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);Ⅲ组较Ⅱ组除血浆D-LA(P<0.05)降低外,其余指标之间差异无统计学意义(P>0.05);Ⅳ组较Ⅱ组降低,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅴ组较Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ组降低,差异有统计学意义(P<0.05 or P<0.01)。光镜下见Ⅱ组大鼠小肠粘膜绒毛高度水肿、大片状坏死、脱落,缺损,粘膜下血管塌陷,固有层内腺体灶性区域坏死;Ⅲ组和Ⅳ组小肠粘膜变化较Ⅱ组略减轻;Ⅴ组大鼠小肠粘膜绒毛轻度水肿,绒毛轻度倒伏,粘膜下血管较充盈。电镜下见Ⅱ组大鼠小肠粘膜线粒体高度肿胀,嵴缺失,内质网肿胀或融合,上皮细胞微绒毛稀疏、缺如,细胞萎缩,大量细胞核浓缩,染色质边聚;Ⅲ组、Ⅳ组大鼠小肠粘膜线粒体、内质网、微绒毛、细胞核浓缩,染色质边聚较Ⅱ组略减轻;Ⅴ组大鼠小肠粘膜上皮细胞线粒体、内质网肿胀轻微,上皮细胞微绒毛排列尚规整。结论:1.本实验在Wiggers改良法基础上成功建立了HS大鼠模型;2.静脉复苏加PD-2液腹腔复苏可明显降低血浆DAO活性、D—LA及内毒素含量。证明其通过改善HS大鼠小肠粘膜组织病理学和亚细胞形态变化,抑制肠道菌群移位而实现对小肠粘膜的保护作用;3.PD-2液腹腔复苏对HS大鼠小肠粘膜的保护作用可能优于生理盐水腹腔复苏。
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