氯虫苯甲酰胺胁迫下小菜蛾ABCC1-5 mRNA的表达及8种蜕皮激素类似物的活性筛选

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为探讨小菜蛾Plutella xylostella ABC转运蛋白(ATP-binding cassette transporter)与氯虫苯甲酰胺代谢的关系,本文采用实时荧光定量RT-PCR技术,测定了小菜蛾不同抗性种群及LC50的氯虫苯甲酰胺处理不同时间后ABCC1-ABCC5m RNA的表达量;并检测了其中过表达的ABCC3-ABCC5在小菜蛾不同发育阶段和4龄幼虫不同组织中的表达量。所检测的5个ABCC基因在氯虫苯甲酰胺抗性品系中均上调表达,最高为敏感品系的2倍;LC50的氯虫苯甲酰胺处理后ABCC3、ABCC4和ABCC5 m RNA的表达量分别上调2.16、2.81和1.85倍,ABCC1和ABCC2则分别下调为对照组的65.8%和37.2%。ABCC3 m RNA在幼虫期和雄性成虫中表达量显著高于其它时期;ABCC4的m RNA在各发育阶段表达量差异不大,其中在预蛹期最高;ABCC5的m RNA在3龄幼虫中表达量显著性高于其它龄期。在同一发育阶段,小菜蛾ABCC4的表达量显著高于ABCC3和ABCC5。在4龄幼虫各组织中,ABCC3、ABCC4和ABCC5在中肠中的表达量均显著高于其它组织。在同一组织中,小菜蛾ABCC4的表达量显著高于ABCC3和ABCC5的表达量。推测小菜蛾ABCC3、ABCC4和ABCC5可能在其对氯虫苯甲酰胺的代谢中起作用,其中ABCC4的作用可能更大。该研究结果为进一步探究小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的代谢与ABCC1-ABCC5的关系奠定了基础。八种蜕皮激素类似物根据甲氧虫酰肼结构合成而来,其毒力可能与特定结构有关。实验中,小菜蛾在100mg/L蜕皮激素类似物处理时,得到了药效最好的化合物为Ⅲ系列化合物的Ⅲ-8,其100ppm浓度下死亡率为75.70%,显著性高于其它化合物,甚至高于对照药剂甲氧虫酰肼Methoxyfenozide。这可能是Ⅲ-8含有的某个特殊基团有较高杀虫活性。Ⅲ系列化合物药效整体上好于Ⅳ系列化合物,这可能是因为Ⅲ系列化合物共同含有的基团比Ⅳ系列化合物共同含有的基团杀虫活性高。Ⅲ系列化合物在100ppm浓度下死亡率均高于10%,其中药效最差为Ⅲ-3,死亡率为17.23%。Ⅳ系列化合物在100ppm浓度下死亡率均低于10%,药效最好的是Ⅳ-7,死亡率为8.39%,最差的是Ⅳ-8,死亡率为2.89%。对照药剂甲氧虫酰肼在100ppm浓度下死亡率为67.95%。本实验旨在为新药物的研发提供理论基础。Ⅲ-8化合物杀虫毒力高于已经上市的商品药甲氧虫酰肼。研究结果助于研发新型杀虫剂,以期在延缓小菜蛾抗药性中发挥作用。
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