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目的:研究脓毒症患者外周血中T淋巴细胞不同亚群和T淋巴细胞凋亡的变化,分析其对患者病情进展和预后的影响,探讨其在免疫抑制/免疫麻痹和预后中的作用。方法:收集2014年10月~2015年12月重庆医科大学附属第一医院重症医学科收治的脓毒症患者55例,随访患者28天生存率,根据预后不同,分为存活组和死亡组;同时将健康体检者30例纳为对照组。应用流式细胞仪检测脓毒症患者外周血中T淋巴细胞不同亚群绝对值计数及其比例,分析其与APACHEⅡ评分、预测死亡危险率(R)及SOFA评分的相关性;采用免疫磁珠技术从外周血中分选出CD3~+T淋巴细胞,利用流式细胞技术和Tunel染色检测细胞凋亡。用脓毒症患者和健康志愿者血清体外刺激Jurkat细胞24 h,通过流式细胞技术、Tunel染色法检测不同血清诱导Jurkat细胞凋亡的变化,Western blot法检测激活型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase3),抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和髓样细胞白血病-1(Myeloid cell leukemia 1,Mcl-1)的表达水平。结果:脓毒症患者外周血中总T淋巴细胞(CD3~+)及其亚群(CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+T细胞)绝对值计数均显著低于健康对照组,与患者APACHE II评分、SOFA评分和预测死亡危险率(R)呈负相关关系;脓毒症患者死亡组循环中总T淋巴细胞及其亚群(CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+T细胞)绝对计数较存活组减少更显著,差异均具有统计学意义(p<0.05);脓毒症死亡组患者的外周血中T淋巴细胞亚群比例失衡,CD3~+CD4~+细胞比例明显下降,CD3~+CD8~+细胞比例相对增加,其CD4~+/CD8~+比值下降,差异有统计学意义(p<0.05),且CD4~+/CD8~+比值与患者APACHE II评分、SOFA评分和R呈负相关关系;与健康照组比较用流式细胞技术和Tunel染色检测均提示脓毒症患者外周血中CD3~+T淋巴细胞凋亡增加,且死亡组增加更明显;脓毒症存活亚组和死亡亚组患者血清诱导的Jurkat细胞凋亡较正常对照组血清诱导明显增加,同时通过免疫印迹法发现脓毒症患者Cleaved-caspase 3表达上调,抗凋亡蛋白Mcl-1、Bcl-2表达明显减少,尤其以死亡组变化更加为明显。结论:脓毒症患者免疫稳态失衡引发免疫功能障碍,T淋巴细胞凋亡增加,其绝对值计数明显减少且亚群比例失衡从而发生免疫抑制/免疫麻痹,与病情严重程度和预后密切相关。