润滑油降解菌的筛选和降解性能研究

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润滑油在工业汽车等方面有着广泛的应用,但是废旧润滑油中含有烷烃、环烷烃、芳香烃及重金属等难降解成分,不加处理,会造成环境污染。物化方法操作成本高,降解不彻底,且二次污染严重,而生物法可以将有毒害污染物作为底物进行有效降解。筛选出高效的降解菌成为生物修复技术的核心。本研究旨在筛选高效降解废润滑油的菌株,并对其降解润滑油性能研究,得到如下结论:(1)从长期被原油污染的土壤中筛选出2株降解润滑油菌株,命名菌株X1和X2,镜检为细菌,采用16Sr DNA技术鉴定菌株X1和X2,得到其基因片段序列,在GenBank上获得登录号分别为KX620435和KX620436,经Blast和进化树分析确定菌株X1和X2分别为伤口埃希菌和黄假单胞菌。(2)对菌株X1和X2测定,得出菌株X1的降解效果较好,其降解效果达40.83%。对菌株X1生长培养基正交优化,得出培养基中成分影响程度由高到低是蛋白胨,牛肉膏,氯化钠;优化后的培养基组分是水1000 mL,牛肉膏5 g,氯化钠4.50 g,蛋白胨10 g,pH为7.0。优化后菌株X1的干重从1.49 g/L提高至1.91 g/L,增长了1.28倍。对菌株X1生长影响因素单一试验探究得出:在最优条件下,即转速160 r/min,温度35℃,pH 7.0,培养24 h时,菌株X1干重达2.34 g/L。(3)对菌株X1降解润滑油性能探究:(1)菌株X1接种到含润滑油无机盐培养基的最佳接种量是4%;最佳pH是7.5;初始润滑油浓度越低菌株X1降解效果越好;菌株X1的降解效果随氯化钠浓度的升高而降低,当不加氯化钠时降解效果最好。(2)不同的氮源对菌株X1降解效果由高到低为:NaNO3>NH4Cl>NH4NO3>(NH4)2SO4>CO(NH2)2;外加碳源对菌株X1降解效果影响为:麦芽糖>葡萄糖>淀粉>柠檬酸>蔗糖。(3)对菌株X1降解的影响因素接种量、温度、麦芽糖浓度、初始润滑油浓度正交优化试验,得出在温度35℃,接种量6%,润滑油浓度1000 mg/L,不加麦芽糖,以润滑油为唯一底物时,降解效果达63.44%。(4)采用X1、X2混合菌株复配对降解润滑油效果进行研究:当菌株X1:X2=1:3,总混合菌接种量为8%时对润滑油的降解效果最好,降解效果达80.92%。(5)通过对菌株X1的生长和降解动力学研究发现:其生长动力学规律符合Logistic模型;其降解动力学规律符合一级速率模型。
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