自1975年Kohler和Milstein创立淋巴细胞杂交瘤技术以来，应用单克隆抗体相继发现了多种卵巢癌肿瘤标志。本室于1999年构建的永生化卵巢癌细胞DNA转染体细胞AT₄所分泌的人源性抗卵巢癌单克隆抗体（HMcAb）AT₄确定了一种新的肿瘤标志——人卵巢癌细胞膜表面抗原CAT₄。 本课题以辛酸/硫酸铵法纯化得到的HMcAb AT₄为探针，对正丁醇法提取的人卵巢癌细胞膜表面可溶性抗原粗提物（OV-CBE）进行了Dot blotting、SDS-PAGE、Western blotting分析，旨在了解CAT₄表位的生化性质。 辛酸/硫酸铵沉淀法可纯化转染体细胞AT₄培养上清中的HMcAb AT₄，经SDS-PAGE分析，主要呈现两条区带，分子量分别为54.3kD和25.6kD。 正丁醇法提取的人卵巢癌细胞膜表面可溶性抗原粗提物（OV-CBE）经Dotblotting检测，发现其中含有能被单克隆抗体AT₄识别的CAT₄；生化鉴定结果显示，CAT₄是一种蛋白质，而非糖蛋白、糖脂；SDS和还原剂β-巯基乙醇处理单克隆抗体确定的CAT₄后，会丧失其表位原有的抗原反应性；Western blotting结果表明，HMcAb AT₄识别的CAT₄表面表位是构象依赖性的肽。SDS-PAGE实验显示，OV-CBE含有13条区带，分子量各为91.8kD、88.1kD、78.0kD、76.5kD、74.9kD、69.1kD、59.9kD、56.4kD、53.1kD、44.2kD、36.8kD、32.0kD、26.1kD。 本研究结果提示，人卵巢癌细胞表面可表达一种低分子量的含构象决定簇的肿瘤抗原分子。