油酸和1,25(0H)2D3对人血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用

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目的:探讨油酸对体外培养的人主动脉血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用。方法:采用不同浓度的油酸处理人主动脉血管平滑肌细胞不同时间,未加药物组为对照组,LPS组作为阳性对照。MTT法检测细胞增殖活性;实时荧光定量PCR法检测细胞TLR4、IL-6、IL-8及MCP-1mRNA的表达水平;Western印迹法检测细胞TLR4蛋白表达,ELISA法检测炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1的蛋白表达。结果:油酸在50~200μmol/L浓度之间可促进人主动脉血管平滑肌细胞增殖活性,增加油酸浓度则抑制细胞的增殖(P<0.05);油酸上调人主动脉血管平滑肌细胞TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1mRNA表达的最大幅度分别为对照组的6.5倍、7.4倍、7.4倍和7.1倍(P<0.05)。200μmol/L油酸处理人主动脉血管平滑肌细胞后TLR4蛋白表达的灰度值比值为(1.70±0.62),与对照组(0.29±0.22)比较,差异有统计学意义(P<0.盯);IL-6、IL-8和MCP-1蛋白的表达水平最大上调幅度分别为对照组的2.16倍、1.93倍和2.06倍(均P<0.05)。结论:油酸可调节人主动脉血管平滑肌细胞增殖活性且具有明显的时间-剂量依赖性;油酸可诱导人主动脉血管平滑肌细胞TLR4mRNA及蛋白质、炎症因子IL-6、IL-8、MCP-1mRNA与蛋白水平表达。油酸诱导人主动脉血管平滑肌细胞产生炎症反应可能是通过激活TLR-4信号通路而发挥作用的。目的:探讨1,25(OH)2D3(1,25-dihydroxyvitamin D3)对人主动脉血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用。方法:不同浓度1,25(OH)2D3干预人主动脉血管平滑肌细胞,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中炎症因子IL-6、IL-8及MCP-1mRNA及TLR4基因mRNA的表达水平。结果:1,25(OH)2D3抑制了人主动脉血管平滑肌细胞IL-6、IL-8、MCP-1mRNA水平的表达。与对照组比较,IL-6、IL-8和MCP-1mRNA表达的最大下调幅度约为58%、69%和43%(P<0.05)。小剂量(1nmol/L)1,25(OH)2D3也明显抑制了TLR4mRNA的表达(P<0.05)。结论:1,25(OH)2D3抑制了人主动脉血管平滑肌细胞中炎症因子IL-6、IL-8、 MCP-1mRNA的表达;小剂量1,25(OH)2D3明显抑制了TLR4mRNA表达;1,25(OH)2D3很有可能通过下调TLR4信号表达而抑制人主动脉血管平滑肌细胞中炎症因子IL-6、IL-8、MCP-1的表达。
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