【摘 要】
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目的:通过TCGA数据库获取CXCL5在人喉癌组织中的表达量,并分析其相关的调控机制,进一步实验验证CXCL5在人喉癌组织和细胞中的表达情况,通过Si RNA转染人喉癌细胞系AMC-HN-8,探索通过靶向沉默CXCL5后对其增殖、侵袭、迁移、周期及凋亡相关的生物学功能的影响,进而为CXCL5在喉癌中的生物治疗领域提供理论学依据。方法:1.利用TCGA数据库获取喉癌相关RNA-seq数据,分析CXC
【基金项目】
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国家自然科学基金“2.18年山西省卫生和计划生育委员会科研基金（编号:2018044）”
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目的:通过TCGA数据库获取CXCL5在人喉癌组织中的表达量,并分析其相关的调控机制,进一步实验验证CXCL5在人喉癌组织和细胞中的表达情况,通过Si RNA转染人喉癌细胞系AMC-HN-8,探索通过靶向沉默CXCL5后对其增殖、侵袭、迁移、周期及凋亡相关的生物学功能的影响,进而为CXCL5在喉癌中的生物治疗领域提供理论学依据。方法:1.利用TCGA数据库获取喉癌相关RNA-seq数据,分析CXCL5基因在喉癌和癌旁组织中的表达差异;通过GSEA富集分析CXCL5高表达组富集到的信号通路,通过ss GSEA分析CXCL5与喉癌肿瘤免疫浸润水平的关系,构建CXCL5共表达基因网络并对其进行GO和KEGG富集分析。2.选取2019年1月至2020年12月山西医科大学第一医院60例喉鳞癌组织标本及癌旁组织标本,利用免疫组织化学染色检测喉癌组织中CXCL5蛋白表达;培养人喉癌细胞系AMC-HN-8,q PCR法检测喉癌细胞中CXCL5 m RNA的表达;通过RT-PCR筛选出敲降效率较高的两组Si RNA,以NC组为阴性对照,通过CCK8法检测喉癌细胞增殖情况,Transwell小室检测侵袭、迁移情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果:1.通过TCGA数据库得到CXCL5 m RNA在喉癌组织中表达水平上调;GSEA富集分析发现富集到JAK STAT signaling pathway、cytokine-cytokine receptor interaction、MAPK signaling pathway等通路;ss GSEA分析在DC、Neutrophils、NK cells和TH17 cells免疫细胞评分存在统计学差异;2.通过免疫组化和Q-PCR实验验证:喉癌组织标本中CXCL5蛋白的表达水平明显高于癌旁组织,喉癌细胞系中CXCL5 mi RNA表达水平显著提高;体外细胞实验表明:在AMC-HN-8细胞中抑制CXCL5的表达,可以抑制肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移的能力,通过G2/M期抑制细胞周期,促进其凋亡。结论:CXCL5在喉癌中呈现高表达水平,能够促进肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等能力,在肿瘤的进展中起促进作用。
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