目的：1.利用BOP [N-亚硝基双(2-氧丙基)胺]创建金黄地鼠肝内胆管癌（ICC）模型。2.研究Wisp-1蛋白、β-catenin蛋白、TGF-β1蛋白及Smad4蛋白在ICC中的表达情况及与肿瘤发生的关系。方法：1.采用30只8–9周龄雌性金黄地鼠（实验组27只，对照组3只），实验组动物皮下注射大剂量BOP共5次（每周1次，首次剂量为70mg/kg体重，以后每次20mg/kg），对照组注射等剂量生理盐水。首次用药后17-54天实验组12只动物死去，期间4只动物逃逸，同时处死一只对照组动物，取其肝脏组织制作石蜡切片做组织病理学观察；54天处死余下存活的13只动物（包括11只实验组动物与2只对照组动物），取肝脏组织部分做石蜡切片，部分-80°C冰箱保存。2.汇总57例蜡块（吴泽珊用大剂量BOP诱导出金黄地鼠ICC实验中所获的肝组织蜡块31例，本次试验所获的肝组织蜡块26例），用免疫组织化学方法检测其中Wisp-1、β-catenin、TGF-β1及Smad4蛋白的表达情况，同时选取40例人ICC蜡块做免疫组化以作比较,再用蛋白质印迹法检测13例新鲜组织中TGF-β1及Smad4蛋白的表达情况。结果：1.实验组大部分动物(14/23)发生了ICC，部分动物(7/23)发生了胆管不典型增生，1例发生了灶性胆管增生，1例无胆管增生。2.Wisp-1、β-catenin、Smad4蛋白在金黄地鼠ICC组织、胆管不典型增生组织中的阳性表达均高于正常组织(P<0.01),胆管不典型增生组织中的阳性表达有高于ICC组织的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05); TGF-β1蛋白在金黄地鼠ICC组织中的阳性表达高于正常组织(P<0.01),胆管不典型增生组织中的阳性表达有高于正常组织的趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)，胆管不典型增生组织中的阳性表达低于ICC组织(P<0.05)。Wisp-1蛋白在人ICC组织中的阳性率高于金黄地鼠ICC组织(P<0.05)；β-catenin、TGF-β1蛋白在人ICC组织中的阳性率有高于金黄地鼠ICC组织的趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)；Smad4蛋白在人ICC组织中的阳性率有低于金黄地鼠ICC组织的趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白质印迹法的结果显示TGF-β1蛋白在金黄地鼠ICC组织中的表达低于胆管不典型增生组织及正常组织(P<0.05),在胆管不典型增生中的表达有低于正常组织的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。而Smad4蛋白在金黄地鼠ICC组织中的表达高于胆管不典型增生组织及正常组织(P<0.05),在胆管不典型增生中的表达有高于正常组织的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论：1.大剂量BOP可以诱导金黄地鼠ICC，这为研究ICC提供了可靠的动物模型，具有成模周期短、可重复性高等优点。2.免疫组化实验证实了无论人肝内胆管癌还是BOP诱导金黄地鼠肝内胆管癌，β-catenin与Wisp-1均呈高表达，尤其是在胆管不典型增生的阶段，两者的表达甚至有高于胆管癌的趋势，这说明在胆管癌的发生初期，β-catenin与Wisp-1就发挥了重要作用,与肝内胆管癌发生的分子病理学基础密切相关。3.免疫组化显示TGF-β1蛋白在金黄地鼠ICC组织中的表达较正常组织高，在人ICC组织中的表达也有较高表达，但在胆管不典型增生组织中的表达很低，而蛋白质印迹法的结果显示TGF-β1蛋白在金黄地鼠ICC组织中的表达却是低于正常组织及胆管不典型增生组织的，提示TGF-β1蛋白在ICC中的作用有待深入研究。4.免疫组化显示Smad4蛋白在金黄地鼠ICC组织及胆管不典型增生组织中的表达都高于正常组织，在人ICC组织中也高表达，提示Smad4蛋白与ICC的发生发展有关，蛋白质印迹法的结果显示Smad4蛋白在金黄地鼠ICC组织及胆管不典型增生组织中的表达也高于正常组织，提示Smad4在ICC的发生发展过程中有重要的作用。