中风是全球成人死亡的主要原因之一,经常导致严重的神经功能障碍。目前治疗脑梗塞的药物有限,中医药治疗脑梗塞历史源长,但是很多疗效机制不明,通脑饮是我院脑病科临床应用近10年的有效中药方剂,主要应用于治疗痰瘀互阻型急性脑梗死。该方由八味药物组成:川芎、九节菖蒲、制南星、天麻、水蛭、红景天、僵蚕、钩藤。以上诸药合用,共凑通络化瘀,化痰息风之功。既往基础及临床研究实验均表明通脑饮为治疗脑梗塞的有效方剂,为求进一步了解通脑饮的具体疗效机制,探讨通脑饮的促血管生成活性并阐明其作用机制。目的:1、基于UPLC-QTOF-MS研究通脑饮所含有的活性成分;2、研究通脑饮对人脐静脉内皮细胞的增殖、浸润迁移以及成管的影响;2、研究通脑饮对VRI诱导的斑马鱼胚胎的ISVs、SIVs和CtAs的影响,并筛选出通脑饮可能有效作用靶点。方法:1、采用基于UPLC-QTOF-MS技术对通脑饮的成份检测,明确通脑饮的主要化学成分及药效活性物质基础。2、通过CCK-8实验探索通脑饮对HUVECs作用的有效浓度剂量,再观察通脑饮对HUVECs迁移能力及毛细血管成管能力的影响,探讨通脑饮促血管生成活性。3、选取VRI诱导的斑马鱼为研究对象,了解通脑饮对斑马鱼胚胎的ISVs、SIVs和CtAs的影响,并通过VEGF通路抑制剂筛选出通脑饮可能有效作用靶点。结果:本实验以HUVECs和斑马鱼为研究对象,通过对HUVECs的体外实验研究通脑饮的作用机制,实验研究结果显示通脑饮可以促进HUVECs的增殖,逆转细胞凋亡,促进迁移能力,增加成管能力。通过体内实验研究通脑饮对VRI诱导的斑马鱼的效应机制,结果显示通脑饮可增加斑马鱼胚胎的ISVs、CtAs和SIVs的数目,促进ISVs、SIVs和CtAs的表达,体内外实验结果一致,均显示出通脑饮具有一定的促血管新生作用。在筛选通脑饮作用有效靶点时发现VEGFR2、PI3K、Akt、Raf、MEK1/2和ERK1/2可能与通脑饮的促血管生成作用有关,而Src和p38 MAPK可能与通脑饮的促血管生成作用无关。结论:无论是HUVECs体外实验和还是斑马鱼体内实验结果,均显示出通脑饮具有一定的促血管新生作用,在筛选通脑饮作用有效靶点时发现VEGFR2、PI3K、Akt、Raf、MEK1/2和ERK1/2可能与通脑饮的促血管生成作用有关。