【摘 要】
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本文对内酯化脂肪酶产生菌GXU08进行了形态及生理生化特征鉴定,并结合分子生物学对其18S rDNA进行分析,结果表明,菌株GXU08形态和生理生化特征与白地霉的一致,经BLAST分析与白地霉的同源性最高。因此,我们初步命名菌株GXU08为白地霉GXU08(Galactomyces.geotrichum GXU08)。对白地霉GXU08(Galactomyces.geotrichum GXU08)
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本文对内酯化脂肪酶产生菌GXU08进行了形态及生理生化特征鉴定,并结合分子生物学对其18S rDNA进行分析,结果表明,菌株GXU08形态和生理生化特征与白地霉的一致,经BLAST分析与白地霉的同源性最高。因此,我们初步命名菌株GXU08为白地霉GXU08(Galactomyces.geotrichum GXU08)。对白地霉GXU08(Galactomyces.geotrichum GXU08)进行原生质体制备,利用原生质体紫外诱变方法得到脂肪酶活力略有提高的菌体,作为基因组改组的出发菌株群。经过4轮基因组改组,最终得到两株菌株G-4-07与G-4-13,酶活力分别为19.4U和20.7U,比野生菌GXU08的酶活提高了约0.953倍与0.83倍。而且经过多次的传代和摇瓶发酵,突变株的酶活性较稳定。对原生质体紫外诱变方法得到的酶活性略有提高的菌株139#转化环十五内酯,并与野生型菌株GXU08做对照,结果显示,酶活提高,转化率也相应地提高。对经过基因组改组的重组菌株G-4-07和G-4-13进行菌株生长性能和酶学性质的对比研究,结果表明,菌株经基因组改组后其生长性能和酶学性质均发生了变化。本实验证明了基因组改组能够快速提高内酯化脂肪酶的酶活力,提高转化环十五内酯的转化率。由此可见,基因组改组这一新技术对微生物产酶的提高有实际应用价值,特别对长期应用传统菌株改良方法所得到的工业菌株的选育开辟了新思路;它是细胞水平上的定向进化,有助于应用细胞和代谢工程,提供了一个快速产生改良菌株的重组方法。
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