目的:通过脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）的干预使肝星状细胞（hepatic stellate cell HSC）系JS1发生自噬,研究17β-雌二醇（17β-estradiol,17β-E₂）对小鼠肝星状细胞系JS1自噬及蛋白激酶B（AKT）/雷帕霉素靶蛋白（MTOR）信号通路的调控作用,为探讨17β-雌二醇抑制肝星状细胞的自噬机制的研究和临床应用提供新的理论依据。方法:1.培养与传代:将小鼠HSC系JS1培养在含双抗的10%胎牛血清（FBS）的高糖培养基（DMEMH）。培养条件为:37℃,5%的CO₂浓度的恒温培养箱,待细胞生长至融合80%即进行传代。2.不同浓度的LPS干预JS1,其中设置LPS浓度为0、0.01、0.05、0.1、0.25、0.5、1和2μg/ml,CCK-8法测定细胞活性（OD值）并绘制曲线。3.0.1μg/ml的LPS和不同浓度的17β-E₂的共同干预JS1,设置17β-E₂的浓度分别为0、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7、10^-8和10^-9mol/L,另设置含DMSO试剂组（消除17β-E₂溶剂DMSO的影响）,CCK-8法测定细胞活性（OD值）并绘制曲线。4.Western blot检测蛋白的表达设置LPS组,空白组和10^-6、10^-7、10^-8mol/L17β-E₂组,提取并测定各组细胞的蛋白,运用Western blot法检测AKT/MTOR通路蛋白和自噬相关蛋白的表达。5.RTQ-PCR检测m RNA表达设置LPS组,空白组和10^-6、10^-7、10^-8mol/L17β-E₂组,提取各组细胞总RNA,反转录成c DNA,并以c DNA为模板,进行实时q-PCR检测自噬相关基因的表达。6.统计学分析采用SPSS 25.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（x±S）表示,组间差异采用单因素方差分析（One-Way ANOVA）,两两比较用Tukey法检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.LPS干预的JS1的活性结果示:浓度为0.05、0.1和0.25μg/ml的LPS干预的JS1的OD值显著增加,（x±S）分别为2.82±0.15、2.91±0.08和2.76±0.01,较空白组均有统计学意义（P=0.001,0.000,0.027）,并且0.1μg/ml的LPS干预的JS1的OD值最高。2.17β-E₂和0.1μg/ml的LPS共同干预的JS1活性结果示:第1d,各组细胞OD值的大小并无明显差异（P>0.05）;第2d,LPS组的OD值显著高于空白组和10^-6、10^-7、10^-8mol/L的17β-E₂组（P=0.000,0.000,0.003,0.005）,与10^-9mol/L的17β-E₂组无统计学意义（P>0.05）;第3d,LPS组的OD值显著高于空白组和10^-6、10^-7、10^-8mol/L的17β-E₂组（P=0.000,0.012,0.005,0.011）,与10^-9mol/L的17β-E₂组无统计学意义（P>0.05）;第4d,LPS组的OD值显著高于空白组和10^-6、10^-7、10^-8mol/L的17β-E₂组（P均=0.000）,与10^-9mol/L的17β-E₂组无统计学意义（P>0.05）;空白组OD值显著高于10^-3、10^-4、10^-5mol/L的17β-E₂组（P均=0.000）。3.Western Blot法测定自噬相关蛋白和AKT/MTOR信号通路蛋白结果示:LPS组的Beclin1表达量显著高于空白组和10^-6,10^-7,10^-8mol/L17β-E₂组（P均=0.000）,且空白组的Beclin1表达量低于10^-6,10^-7mol/L17β-E₂组（P均=0.000）,与10^-8mol/L17β-E₂无统计学意义（P>0.05）;LPS组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达量显著高于空白组（P=0.007）,且显著低于10^-6,10^-7mol/L17β-E₂组（P均=0.000）,与10^-8mol/L17β-E₂组无统计学意义（P>0.05）;空白组和10^-6,10^-7,10^-8mol/L的17β-E₂的p-AKT/AKT蛋白表达量显著高于LPS组（P=0.001,0.001,0.001,0.005）,17β-E₂组的p-AKT/AKT蛋白表达量与空白组无统计学意义（P均>0.05）,空白组和10^-6,10^-7,10^-8mol/L的17β-E₂的p-MTOR/MTOR蛋白表达量显著高于LPS组（P=0.000,0.043,0.010,0.000）,空白组的p-MTOR/MTOR蛋白表达量显著高于10^-6,10^-7mol/L的17β-E₂组（P均=0.000）,与10^-8mol/L17β-E₂无显著差异（P>0.05）。4.RTQ-PCR检测m RNA表达:LPS组的LC3、Beclin1 m RNA含量显著高于空白组、各17β-E₂组（P均=0.000）,17β-E₂组LC3、Beclin1 m RNA含量显著高于空白组（P均=0.000）。结论:1.10^-6,10^-7,10^-8mol/L 17β-E₂可抑制LPS诱导的JS1细胞自噬作用。2.0.1μg/ml LPS诱导JS1细胞自噬的机制可能与抑制AKT/MTOR信号通路有关。3.10^-6,10^-7,10^-8mol/L17β-E₂抑制0.1μg/ml LPS诱导JS1细胞自噬的机制可能与激活AKT/MTOR信号通路有关。