【摘 要】
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Mac-1（CD11b/CD18）为位于白细胞表面的整合素家族粘附分子之一,它是白细胞游走、趋化、吞噬的基础,在机体防御作用及免疫反应过程中起着极为重要的作用.然而,迄今为止,尽管白细
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Mac-1（CD11b/CD18）为位于白细胞表面的整合素家族粘附分子之一,它是白细胞游走、趋化、吞噬的基础,在机体防御作用及免疫反应过程中起着极为重要的作用.然而,迄今为止,尽管白细胞活化后Mac-1如何参与粘附的研究已相当深入,但关于Mac-1在白细胞脱粘附中的作用及其机制则研究得还很少;对于Mac-1的贮存、转位、变构的过程,尚缺乏在一个细胞对其全过程进行动态定位定量的研究;对不同的激动剂引起的Mac-1的活化过程,还只是一个统一的笼统的模式.为此,该课题拟对Mac-1在细胞内的走向进行研究.以往文献上研究Mac-1的贮存、转位以及内吞的方法,主要采用的是抗体标记Mac-1,用流式细胞术测定或免疫组化技术显微镜下直接观察Mac-1的细胞内分布,但其缺点是不可能在单细胞、活细胞连续地观察,如果要研究在细胞内的走向则还需要使细胞表面通透性增高（permeabilize）,这就难免干扰了细胞的静态及生理过程.我们决定尝试采用绿色荧光蛋白（GFP）标记Mac-1形成融合蛋白的方法,研究其细胞内定位和细胞内的走向.实验结果,可以看到Mac-1活化后的走向是由胞浆内转位到质膜上,然后内吞,内吞后被降解或可被再利用,而与此同时粘附活性亦发生相应的变化,提示内吞是白细胞粘附活性降低的重要机制之一.
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