中药炮制是我国的一项传统制药技术,也是我国医药学特有的制药术语,历史悠久,内容丰富,体现了朴素辩证法思想,对中药学的发展做出了重要贡献,是中医药的特色之一。为此,“十五”期间,中药鳖甲等50种中药饮片的炮制,被列为国家重点攻关项目,以期通过系统研究,利用现代医学理论和科技手段对中药炮制理论和方法进行去粗取精、去伪存真,达到改革完善中药炮制方法之目的。本文对鳖甲化学成分、炮制工艺及质量标准,开展了以下研究工作:一、文献综述综合评价分析了鳖甲在炮制学、化学成分、药理学、临床应用等相关领域的研究文献,为制定切实可行的研究方案、确定研究考察指标及研究工作起点奠定了坚实的基础,共引用文献21篇。对肽类化合物的分离纯化、结构鉴定及其药理活性进行了综述,并对从中药中提取分离肽类化合物进行了总结,共引用文献94篇。二、实验研究1.现代文献研究认为,氨基酸为鳖甲中的主要有效成分。但是经过试验研究,我们发现鳖甲中的主要成分为寡肽类化合物。文献报道,某些寡肽类化合物具有抗疲劳及免疫调节等药理活性,这与鳖甲的药理活性相吻合。2.对从中药鳖甲中分离、纯化寡肽进行了一系列的研究,尝试了应用水提醇沉法、沉淀法、各种柱层析(包括硅胶、凝胶、大孔吸附树脂、反相硅胶等)分离方法进行分离,初步确定了一些分离、纯化寡肽的方法。并且应用于中药鳖甲的寡肽类化学成分的研究。3.对醋鳖甲的化学成分进行研究,为合理解释鳖甲的传统功效提供依据。(1)对醋鳖甲提取工艺进行考察。以出膏率、游离总氨基酸的含量为指标,对提取方法,提取溶剂,提取时间等因素进行优选,最终确定药材加10倍量水,回流提取三次,每次两小时为最佳工艺。(2)采用两种不同方法对鳖甲中的寡肽类化合物进行分离、纯化。方法一:先用大孔吸附树脂进行粗分,然后经HPLC进行纯化,得到5个寡肽类化合物。方法二:对醋鳖甲进行水提醇沉,分为80%醇沉淀部分和95%醇溶解部分。将两部分分别上柱,共分离得到4个单体化合物。其中80%醇沉淀部位1个,95%乙醇溶解部分3个。运用化学方法、谱学方法和氨基酸测序方法鉴定了其中的1个化合物为AAHGPCG,该化合物为首次从自然界分离得到的。4.对鳖甲炮制工艺进行研究,探讨炮制原理。以出膏率、游离总氨基酸的含量为指标,通过试验设计对鳖甲的净制工艺和砂烫醋淬工艺进行研究,确定药材常压下蒸75min后砂烫250℃20min,6%醋精淬,无论从性状还是