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研究背景胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是成人颅内最常见原发性恶性脑肿瘤,尽管最大安全范围手术切除联合术后放疗及替莫唑胺化疗已成为当前临床标准治疗策略,但因其具有恶性程度高、侵袭性强、极易复发的特性,目前胶质母细胞瘤患者的预后不容乐观,整体中位生存期仅14个月。替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)是一种烷化剂,也是目前公认的治疗胶质母细胞瘤的一线化疗药物,具有生物利用度高,且易透过血脑屏障,可使胶质瘤细胞DNA甲基化而抑制细胞增殖和促进细胞凋亡,从而发挥其抗肿瘤作用。研究表明替莫唑胺可有效延长患者的中位生存时间,但相当部分患者会对TMZ表现出不同程度的获得性耐药,最终导致化疗失败。因此TMZ化疗耐药是制约胶质瘤化疗疗效的重大问题。甲基化调控J蛋白(Methylation-controlled J protein,MCJ/DNAJC15)是一种位于线粒体内膜上的热休克蛋白(HSP)40家族成员。既往研究表明MCJ低表达或表达缺失与乳腺癌、胃癌等多种肿瘤的不良预后密切相关,尤为重要的是MCJ参与乳腺癌、卵巢癌等肿瘤的化疗耐药,但在胶质瘤耐药中未见研究报道。研究目的明确MCJ与胶质瘤TMZ化疗耐药的关系;探讨MCJ在胶质瘤TMZ化疗耐药中的作用;证实ATM/Chk2信号通路介导MCJ调控胶质瘤TMZ耐药。研究方法通过qPCR、Western blot检测胶质瘤TMZ耐药细胞和亲本细胞中MCJ的表达,分析MCJ的表达与胶质瘤耐药的相关性;慢病毒过表达或shRNA干扰胶质瘤细胞中MCJ的表达,CCK-8细胞活性实验、Western blot、流式凋亡、EdU等研究MCJ在胶质瘤TMZ耐药中的作用;通过Western Blot等探讨ATM/Chk2信号通路在MCJ调控胶质瘤TMZ耐药中的作用。结果1)通过渐次增加体外GBM细胞TMZ剂量能够成功构建胶质瘤TMZ耐药细胞株,且具有耐药性;2)MCJ在胶质瘤TMZ耐药细胞中显著低表达,其低表达与胶质瘤耐药和预后不良相关;3)干扰MCJ的表达可促进亲本胶质瘤细胞TMZ耐药,同时抑制TMZ诱导的细胞凋亡;过表达MCJ可促进胶质瘤TMZ耐药细胞的化疗增敏;4)干扰MCJ的表达可减少TMZ诱导的p-H2AX表达,而胶质瘤TMZ耐药细胞过表达MCJ可增加p-H2AX的表达,并减少p-ATM和p-Chk2的表达。结论1)胶质瘤TMZ耐药细胞株成功构建,具有明显耐药表型;2)MCJ表达下调提示胶质瘤耐药及预后不良;3)MCJ可促进胶质瘤细胞TMZ化疗增敏;4)初步证实MCJ通过ATM/Chk2信号通路调控胶质瘤TMZ耐药,但其深层次机制尚需进一步探究。