基于亚甲基蓝,萘酰亚胺荧光团检测HClO、H2O2、Cys的荧光探针设计合成及细胞成像研究

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次氯酸(HCl O)、过氧化氢(H2O2)是活性氧(ROS)的重要组成部分,被认为是生活中的强效抗菌剂在生物体免疫反应过程中杀死细菌。半胱氨酸(Cys)在维持多种活性物质的转导和氧化还原稳态中起重要作用。次氯酸是肿瘤细胞中的一种活性物种,目前对肿瘤的治疗方法有手术切除治疗,放射治疗,肝移植治疗,等临床治疗。在常规治疗中主要以化疗、药物为主,但它们缺乏靶向性。现阶段正在寻找一种能够准确定位到这些肿瘤细胞中,且能应用于临床的科学方法是广大临床工作者不断探索的需求,也是我们作为科研研究者不断追求的目标。因此,本文设计了具有靶向识别肿瘤细胞的荧光探针。它通过吲哚美辛靶向筛选以及次氯酸的表达。它能够将探针靶向识别带入细胞并释放荧光团。该探针通过细胞成像发现能够区分正常细胞与肿瘤细胞。其中对大鼠胶质瘤细胞中的9L细胞成像效果最佳。另外,还设计了基于H2O2、Cys荧光探针的合成。本文主要选用一种近红外荧光团亚甲基蓝来设计合成靶向的近红外荧光探针。(一)用连接基团乙二胺的一端连接近红外荧光团亚甲基蓝另一端分别连接吲哚美辛(IMC)和参照物对甲基苯乙酸的近红外荧光探针IMC-1a和R-1,通过光物理性质表明,探针IMC-1a可以快速响应(30s),稳定性好。最后该探针成功应用于大鼠胶质瘤细胞(C6、RG2、9L)、人非小细胞肺癌(A549)、人宫颈癌细胞(He La)中的细胞的成像。(二)用长链的连接基团1,2-双(2-氨基乙氧基)-乙烷一端连接亚甲基蓝另一端分别连接吲哚美辛(IMC)和参照物对甲基苯乙酸合成的近红外荧光探针IMC-2a和R-2。通过光物理性质表明,探针IMC-2a可以快速响应(30s),稳定性好。最后该探针成功应用于大鼠胶质瘤细胞(C6、RG2、9L)、人非小细胞肺癌(A549)、人宫颈癌细胞(He La)中的细胞的成像以及通过尾静脉注射处死后的实验小鼠邻近组织细胞成像可以用于次氯酸的检测和细胞的生物成像。(三)通过双二硼连接4-溴-1,8-萘二甲酸酐,再连接N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺和香豆素最后与丙烯酰氯反应设计合成了能够用于检测H2O2和Cys的荧光探针F1。通过光物理性质表明探针对H2O2和Cys具有好的选择性和稳定性。
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