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目的:评价5％牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射法制备重症急性胰腺炎肾损伤大鼠模型的情况;阐明p38MAPK、PI3K/PKB信号通路在重症急性胰腺炎肾损伤模型大鼠发病中的作用及其抑制剂的干预作用;进一步探讨清下化瘀方干预重症急性胰腺炎肾损伤模型大鼠的可能作用机制。 方法:雄性、清洁级SD大鼠70只，正常喂养一周后，根据体重随机分为七组:假手术组(S0)、模型组(SAP)、二甲基亚砜溶酶对照组(DMSO)、PI3K/PKB信号通路抑制剂Wortmannin对照组(WTN)、p38MAPK信号通路抑制剂SB203580对照组(SB)、善宁组(SN)和清下化瘀方组(QXHY)，每组10只大鼠，实验前12h予禁食、不禁水。次日采用5％牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射法制备重症急性胰腺炎肾损伤大鼠模型，DMSO、WTN和SB组分别在造模前4h腹腔注射DMSO(0.35mg/kg)、Wortmannin(0.35mg/kg)和SB203580(5mg/kg)，善宁组在造模前1h、造模后1h、23h予善宁针剂皮下注射，清下化瘀方组在相同的时间段予中药灌胃，假手术组和模型组在相同的时间段予皮下注射生理盐水。造模24h后，采用10％水合氯醛(0.3mL/100g)腹腔麻醉后开腹，腹主动脉取血，分离血清用于检测血清淀粉酶(AMY)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)，采用酶联免疫法(ELISA法)检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6(IL-6);取胰腺和肾组织经HE染色显微镜下观察胰腺和肾组织的病理学变化;免疫组化法检测肾组织中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的阳性表达;原位末端标记法（TUNEL法）观察肾组织细胞凋亡的变化;取剩余胰腺和肾组织通过荧光定量PCR法检测肾组织中NGAL mRNA的表达，采用免疫印迹法(Western Blot)检测肾组织中NGAL、蛋白激酶B(PKB)、磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)及与细胞凋亡相关的促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。 结果: 1.与假手术组相比，模型组大鼠血清AMY、BUN、Cr、TNF-α、IL-6的水平明显升高;模型组大鼠胰腺组织坏死、炎性细胞浸润及间质水肿、充血等病理损伤程度较重;模型组大鼠肾组织出现肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性、坏死及脱落，肾间质水肿和炎性细胞浸润等病理变化;模型组大鼠肾组织凋亡细胞明显增多;模型组大鼠肾组织中NGAL蛋白的阳性表达量明显增加，以肾小管周围分布明显，肾小球未见明显表达;肾组织中NGAL mRNA相对高度表达;肾组织中NGAL、p-PKB、p38MAPK、p-p38MAPK和促凋亡蛋白Bax高度表达，而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达明显减少。与模型组相比，WTN、SB、善宁组和清下化瘀方组大鼠血清AMY、BUN、Cr、TNF-α、IL-6的水平明显下降;胰腺和肾组织病理损伤程度明显减轻;肾组织凋亡细胞明显减少，肾组织中NGAL蛋白阳性表达量和NGAL mRNA的相对表达明显减少;肾组织中NGAL、p-PKB、p38MAPK、p-p38MAPK和促凋亡蛋白Bax的表达明显减少，而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著增加。其中，WTN、SB、善宁组、清下化瘀方组在改善血清淀粉酶、尿素氮和肌酐、胰腺和肾组织损伤病理学评分、肾组织中相关指标等方面作用相当，无明显差异，SB、善宁组在改善TNF-α、IL-6、细胞凋亡及NGAL mRNA表达方面优于WTN和清下化瘀方组。模型组和DMSO组大鼠各项指标相比，均无统计学差异。各组大鼠肾组织中PKB蛋白的表达无统计学差异。 2.相关性分析结果显示，大鼠的血清指标、胰腺和肾组织病理损伤程度、细胞凋亡指数、NGAL免疫组化阳性表达、NGAL mRNA的表达、肾组织中p38MAPK、p-p38MAPK、p-PKB与Bax之间均呈正相关性，而p38MAPK、p-p38MAPK、p-PKB、Bax与Bcl-2蛋白的表达呈负相关。 结论: 1.胆胰管逆行注射法可较好的制备重症急性胰腺炎伴肾损伤大鼠模型。 2.中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白可以作为重症急性胰腺炎肾损伤早期的诊断标志物之一。 3.p38MAPK、PI3K/PKB信号通路参与了重症急性胰腺炎肾损伤大鼠的发病过程，其抑制剂均对重症急性胰腺炎肾损伤大鼠具有一定的干预作用。 4.清下化瘀方能明显改善重症急性胰腺炎肾损伤大鼠血清淀粉酶、尿素氮、肌酐的水平，调节血清细胞因子TNF-α和IL-6的表达，减轻大鼠胰腺与肾组织的病理学损伤程度，减少肾小管上皮细胞的凋亡，抑制p38MAPK、PI3K/PKB信号通路中磷酸化的p38MAPK、PKB蛋白的表达，调控细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达，具有较好的干预重症急性胰腺炎肾损伤模型大鼠的作用。其作用机制可能为通过调节p38MAPK、PI3K/PKB信号通路中的关键蛋白的磷酸化程度，抑制信号通路的活化，减少细胞因子TNF-α和IL-6的释放，调节细胞凋亡蛋白的表达，从而减轻炎症反应，改善肾小管上皮细胞凋亡的程度，发挥干预重症急性胰腺炎肾损伤模型大鼠的作用。