活血补肾法及接骨膏对创伤性骨折愈合过程中VEGF表达的影响

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目的:总结归纳以活血补肾为治则治法、以药物外治法为治疗措施治疗创伤性骨折的理论,探讨活血补肾法在创伤性骨折中的运用。同时建立家兔骨折模型外敷接骨膏,观察接骨膏对家兔骨折愈合过程中BMD和VEGF表达的影响,进一步从分子水平探讨接骨膏促进家兔骨折愈合的作用机制,为活血补肾法治疗创伤性骨折提供理论依据。方法:(1)文献研究:以“活血补肾法”和“创伤性骨折”为主题词,检索计算机数据库,查阅古今文献,归纳总结以活血补肾为治则治法、以药物外治为治疗措施,治疗创伤性骨折的相关理论。(2)实验研究:成年健康家兔60只,用小钢锯制造左侧桡骨中段约3mm骨缺损模型成功后,将实验动物随机分为2组,即接骨膏实验组(简称实验组)和模型对照组(简称对照组),实验组外敷接骨膏,小夹板包扎固定;对照组不予敷药,以同样大小夹板包扎固定。分别于造模术后第3、6、10W末行BMD测定后,处死实验组和对照组的动物各10只,以骨缺损为中心,两端各取0.5cm做骨标本,用15%EDTA脱钙,石蜡包埋切片,行骨痂组织学检查和免疫组化检测VEGF。(3)数据统计:所有检测数据采用SPSS17.0统计软件进行统计学处理,用(±s)表示,均采用两个样本均数比较的t检验。结果:(1)文献研究:以活血补肾为治则治法、药物外治作为治疗措施治疗创伤性骨折是临床常用方法、疗效显著。(2)BMD测定::分别于造模术后第3W、6W、10W末行BMD检测,实验组BMD值明显优于对照组,有显著性差异(P﹤0.01)。(3)组织学检查:造模后第3W末,实验组标本成骨细胞有显著增生,并形成了骨小梁、骨样组织,骨折断端表面有肉芽组织形成,出现一些骨膜细胞,在创伤处可见骨母细胞增生,纤维组织增生,骨折断端有修复性再生;对照组标本骨折断端也可见肉芽组织形成,但骨母细胞不明显,纤维组织和骨折断端的修复性再生相对较少。造模后第6W末,实验组标本可见骨折断端新生骨组织逐渐增多,与断端界限比较明显,骨折断端的纤维连接和纤维骨痂有明显修复,可见明显增生,骨折断端表面的有新骨形成,并逐渐形成钙盐,骨髓腔基本再通;对照组标本也可见骨折断端表面有纤维骨痂形成,但骨痂数量和成骨细胞数量较实验组少,软骨成分相对较少。造模后第10W末,实验组可见骨折断端间均以骨性骨痂为主,骨痂内的骨小梁间可见血管生成,骨髓腔再通;对照组也可看到骨折断端有骨性骨痂形成,但骨痂内的骨小梁间血管生成相对较少,骨髓腔基本再通,并可见较少的软骨成分。(4)免疫组化检测VEGF:实验组和对照组骨折断端VEGF表在不同时期达均呈阳性。造模后第3W末,实验组和对照组骨标本断端VEGF表达强度稍弱,两组MOD值有显著性差异(p﹤0.01);造模后第6W末,实验组和对照组骨标本断端VEGF表达明较第3W末明显增强,在血管内皮细胞、软骨细胞、成骨细胞均有较高表达,其中软骨细胞表达最强,两组MOD值有显著性差异(p﹤0.01);造模后第10W末,实验组和对照组骨标本断端VEGF表达较第6W周末明显减弱,但两组MOD值有显著性差异(p﹤0.01)。结论:(1)活血补肾法是根据创伤性骨折血瘀肾虚的病机重点而确立的治则治法,活血补肾法是治疗创伤性骨折的常用治则治法,可以以药物内治法或者药物外治法为治疗措施单独使用,也可以以药物内治法和药物外治法两种治疗措施联合使用,在中医骨伤科学中有着重要的地位。(2)药物外治法作为创伤性骨折的治疗措施,操作简单,运用方便,价格低廉,疗效显著,是中医治疗创伤性骨折的常用治疗措施。(3)以活血补肾为配伍思路的接骨膏外敷治疗创伤性骨折,能促进骨折愈合过程中VEGF的表达,从而促进骨折愈合,缩短骨折愈合时间。接骨膏治疗创伤性骨折主要适用于早期和中期。
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