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溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)是一种炎症性肠病,临床以腹泻和结直肠出血为主要症状。因其发病率逐年升高,发病机制不清晰,难以根治而被世卫组织列为全球性疾病。桦褐孔菌(Inonotus obliquus)具有较强的抗氧化、抗炎活性,且被用于胃痛、胃炎、胃及十二指肠溃疡等多种胃肠道疾病的康复治疗,然而桦褐孔菌抗溃疡性结肠炎作用机制尚未阐明。本研究选取桦褐孔菌多糖提取物(I.obliquus Polysaccharide extract,IOP)、桦褐孔菌正丁醇提取物(I.obliquus N-butanol extract,IOB)、桦褐孔菌乙酸乙酯提取物(I.obliquus Ethyl acetate extract,IOE)和桦褐孔菌正己烷提取物(I.obliquus N-hexane extract,IOH)为研究对象,评价这四个提取物对体内外溃疡性结肠炎模型的缓解作用,并探究其作用机制。主要研究内容与结果如下:(1)H2O2诱导人结肠癌上皮细胞(Caco-2)建立体外溃疡性结肠炎。结果表明:H2O2能够以剂量依赖性的方式抑制Caco-2细胞活力,半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为1.2 m M;H2O2诱导的Caco-2细胞内干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)m RNA表达显著升高。揭示可使用H2O2诱导Caco-2细胞在体外模拟溃疡性结肠炎。(2)桦褐孔菌四个提取物对Caco-2细胞炎症的调节。结果表明:桦褐孔菌四个提取物在浓度为0-100μg·m L-1时对Caco-2细胞活力基本无影响;且可在一定程度上降低H2O2处理的Caco-2细胞中白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、IFN-γ、TNF-αm RNA表达水平,降低细胞炎症水平;同时升高细胞内超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)活性,改善细胞氧化应激,其中以IOE效果最佳,IOP次之。(3)桦褐孔菌四个提取物对NF-κB、JAK/STAT3炎症通路相关蛋白表达的调节。结果表明:桦褐孔菌四个提取物可在一定范围内降低H2O2处理的Caco-2细胞内IL-6、p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、NF-κB蛋白的表达。桦褐孔菌提取物可能通过介导NF-κB和JAK/STAT3信号通路缓解细胞炎症,其中以IOE效果最佳。(4)IOE对葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型的影响。结果表明:IOE能够降低UC小鼠疾病活动指数(Disease activity index,DAI)评分,改善UC小鼠的局部结肠损伤,降低UC小鼠血清中白介素-17(Interleukin-17,IL-17)的含量,以及抑制UC小鼠结肠组织中IL-6、IFN-γ、TNF-α和NF-κB蛋白的表达。IOE可通过抑制炎症因子表达,改善结肠组织损伤,治疗溃疡性结肠炎。(5)采用RNA测序技术(RNA sequencing technology,RNA-seq)检测IOE对UC小鼠结肠组织基因表达的影响。结果表明:DSS和IOE作用后,UC小鼠结肠组织基因表达发生显著变化,其中载脂蛋白C3(Apolipoprotein C3,Apoc3)、S100钙结合蛋白A8(S100 calcium binding protein A8,S100a8)、S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100a9)、同源盒A9(Homeobox A9,Hoxa9)、IL-1β、顺乌头酸脱羧酶1(aconitate decarboxylase 1,Acod1)和基质金属蛋白酶8(matrix metalloproteinase8,MMP8)基因表达变化较为明显;差异表达基因的GO富集分析展示差异基因变化发生在细胞表面、突触和胞外,并通过调节蛋白质结合、过氧化物酶活性等参与氧化还原、免疫和炎症反应;其KEGG pathway富集分析展示差异基因可富集在Wnt信号通路、MAPK信号通路、PI3K-AKT信号通路。表明IOE缓解UC小鼠症状可能与Apoc3、S100a8、S100a9、Hoxa9、IL-1β、Acod1和MMP8基因表达和Wnt信号通路、MAPK信号通路、PI3K-AKT信号通路有关。综上所述,桦褐孔菌提取物能够缓解H2O2诱导Caco-2细胞炎症,且桦褐孔菌乙酸乙酯提取物对DSS诱导的体内溃疡性结肠炎有一定的治疗作用,其作用机制与NF-κB和JAK/STAT3信号通路有关。与此同时,Apoc3、S100a8、S100a9、Hoxa9、IL-1β、Acod1和MMP8基因表达以及Wnt信号通路、MAPK信号通路、PI3K-AKT信号通路也有望成为桦褐孔菌治疗溃疡性结肠炎的潜在靶点。