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松突圆蚧(Hemiberlesia pitysophila Takagi)是我国南方松林危害性极大的昆虫,具有个体小、掩蔽性强等特点,多寄生于松针叶鞘内,形成叶鞘和介壳的双层保护,因此防治难度比其他森林害虫更大。虫生广布拟盘多毛孢(Entomogenous Pestalotiopsis disseminata)是一种防治松突圆蚧的生防菌,其对松突圆蚧具有强致病力,是一种利用分离于自然死亡蚧虫尸体的真菌。本文通过研究虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03侵染松突圆蚧产生的蛋白酶、几丁质酶、脂肪酶活性变化,以及虫生广布拟盘多毛孢对松突圆蚧酚氧化酶原系统的影响,探讨虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03胞外酶的作用、对松突圆蚧酚氧化酶原系统的影响,并分析影响虫生广布拟盘多毛孢对松突圆蚧致病的毒力因子,松突圆蚧对虫生广布拟盘多毛孢侵染的免疫反应等,以探索虫生广布拟盘多毛孢对松突圆蚧的侵染机制和致病机理,为进一步应用虫生广布拟盘多毛孢对松突圆蚧的防治提供科学的理论参考。本研究的主要结果如下:1.通过对虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03菌株不同孢子含量产酶活性的测定及其毒力相关性研究,1×107孢子/mL的虫生广布拟盘多毛孢孢子悬浮液是酶制剂生产和病虫害防治的最佳使用量,该孢子浓度接种松突圆蚧后,松突圆蚧的校正死亡率比低浓度孢子悬液接种得到的校正死亡率高,且它们之间差异显著;该浓度与1×108孢子/mL得到的校正死亡率差别不大。即当虫生广布拟盘多毛孢孢子悬浮液的浓度为1×107孢子/mL时,其蛋白酶、几丁质酶、脂肪酶的产量最大,杀虫的效果最好。2.虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03胞外蛋白酶、几丁质酶、脂肪酶活力与其对松突圆蚧致病力显著相关,即菌株毒力随着蛋白酶、几丁质酶、脂肪酶活性的增高而增强,用于侵染和致死松突圆蚧的效果也最好。3.分别用Folin-酚法、DNS法和对硝基苯酚法测定虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03蛋白酶、几丁质酶和脂肪酶的活力,结果发现蛋白酶的产酶高峰期要早于几丁质酶和脂肪酶,为第5天;几丁质酶产酶高峰为第7天;脂肪酶为第8天。而产蛋白酶的活性一般都高于几丁质酶和脂肪酶的活性。4.松突圆蚧表皮蛋白质的含量为85%,几丁质的含量为9%,脂肪的含量为6%。松突圆蚧表皮中蛋白质的含量均高于几丁质、脂肪的含量,即蛋白质>几丁质>脂肪。5.酚氧化酶最适温度为35℃,当温度在20-40℃的范围内该酶的稳定性较高;酚氧化酶最适pH值为7.5,在pH6.5-7.5范围内表现出较高的稳定性;以L-DOPA为底物,在一定浓度范围内即浓度较小时随浓度的增加而增加;在1-2mg/mL浓度时酚氧化酶表现出较高的活性,在2mg/mL浓度时酶活性有最大值;大于此浓度,酚氧化酶反应速度随着底物浓度的不断增加反而呈现下降趋势。6.虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03对松突圆蚧的酚氧化酶激活系统具有显著作用。研究表明,菌丝裂解液具有激活作用:血浆和血细胞裂解液中酚氧化酶的活性受到菌丝裂解液的影响后,活性能显著提高;菌丝裂解液具有抑制作用:用昆布多糖将血浆或血细胞裂解液中酚氧化酶原激活后,再加入菌丝裂解液,酚氧化酶的活性随之下降。7.松突圆蚧在受到虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03侵染后出现明显的酚氧化酶活性的上升,说明松突圆蚧对虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03有一定的免疫反应。受侵染的松突圆蚧与未受侵染的松突圆蚧接受昆布多糖注射后的酚氧化酶的酶活性水平差异显著,前者活性水平比后者的低;另外,在受到侵染后的第5天开始,昆布多糖的注射已经对酚氧化酶的没有太大影响,差异性已不显著,表明虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03在侵染过程中具有抑制酚氧化酶原激活系统的功能,以此来克服松突圆蚧的免疫反应。