论文部分内容阅读
目的：通过建立人乳腺癌裸鼠种植瘤模型,给予环氧化酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)抑制剂塞来昔布和/或放疗,检测乳腺癌裸鼠种植瘤中COX-2、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及基质金属蛋白酶(matrix metal loproteinases-9,MMP-9)的表达情况,观察COX-2抑制剂塞来昔布是否能增加人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤的放疗敏感性及机制,为寻找具有开发前景的放疗增敏药物提供实验和理论依据。 方法：选择4~5周龄的BABL/c雌性裸小鼠48只,取处于对数生长期的人乳腺癌MDA-MB-231细胞,用培养基配置成细胞密度为1×107/ml的细胞悬液。裸鼠皮肤消毒后用1ml注射器在背部皮下接种上述细胞悬液0.2m1建立种植瘤模型,定期观察,游标卡尺测量肿瘤大小,观察移植后裸鼠的成瘤情况。两周后48只裸鼠全部成瘤,将它们随机分为四组:空白对照生理盐水组(A组)、塞来昔布组(B组)、照射组(C组)、照射+塞来昔布(D组),每组12只。待成瘤裸鼠的移植瘤长至直径5mm时进行实验,A组每只裸鼠给予生理盐水0.2ml/d,B组和D组每只裸鼠给予塞来昔布混悬液40mg/kg/d,用小号灌胃针灌胃给药,连续10日,第10日在给药结束后1小时将C组与D组移植瘤局部单次20Gy的X电子线外照射。每隔5日分别测量每只裸鼠移植瘤的大小并给予称重,第20天后处死荷瘤裸鼠,检测各组移植瘤体积、重量;HE染色观察移植瘤的组织形态;免疫组化检测COX-2、VEGF及MMP-9的表达情况。 结果：1.于裸鼠背部皮下种植2×106个人乳腺癌MDA-MB-231细胞,两周后48只裸鼠全部成瘤,成瘤率100％。 2.治疗前各组裸鼠体重差别无统计学意义(P>0.05),塞来昔布联合放疗对人乳腺癌皮下移植瘤的生长有明显抑制作用,治疗结束后,各组种植瘤重量分别为:对照组1.766±0.261g;塞来昔布组1.299±0.104g;放疗组1.115±0.178g;联合组0.833±0.236g,差异有显著意义(P<0.01)。 3.治疗结束后,各组种植瘤体积分别为:对照组1124.333±41.362 mm3;塞来昔布组996.500±33.066 mm3;放疗组977.750±30.896 mm3;塞来昔布联合放疗组932.416±63.922 mm3,差异有显著意义(P<0.01)。 4.各组裸鼠移植瘤的免疫组化结果显示:COX-2、VEGF及MMP-9在对照组中大多为阳性表达,在塞来昔布组和放疗组中表达稍有下降,而塞来昔布联合放疗组中表达下降更为显著(P<0.05)。 结论：1.塞来昔布联合放疗抑制人乳腺癌MDA-MB-231裸鼠移植瘤明显优于单纯药物组及单纯放疗组。 2.塞来昔布增强人乳腺癌裸鼠移植瘤放疗敏感性的机制可能为: 1)降低了VEGF的表达。 2)塞来昔布通过阻断MMP-9的表达。