温化胶囊对人乳腺癌MCF-7和T-47D细胞株细胞增殖和细胞周期的影响

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目的:研究温化胶囊对人乳腺癌MCF-7和T-47D细胞株细胞增殖和细胞周期的影响。方法:实验分四个阶段进行。第一阶段,使用高效液相色谱法对温化胶囊进行指纹图谱分析,并以乌头碱标准品为对照定量分析温化胶囊所含乌头碱;第二阶段,对MCF-7和T-47D细胞株进行体外细胞培养,设立空白对照组、75μg/ml温化胶囊组及250μg/ml温化胶囊组3组,观察7天,绘制生长曲线,采用重复测量的方差分析法对细胞生长曲线进行线间比较。利用倒置相差显微镜观察两细胞株加药前后的形态学改变。第三阶段,使用流式细胞仪分析温化胶囊对MCF-7和T-47D细胞株细胞周期的影响。第四阶段,研究温化胶囊联合5-Fu对MCF-7和T-47D细胞增殖的影响。常规培养细胞,分6组进行实验:空白对照组、75μg/ml温化胶囊组、250μg/ml温化胶囊组、1μg/ml 5-Fu组、75μg/ml温化胶囊联合1μg/ml 5-Fu组、250μg/ml温化胶囊温化胶囊联合1μg/ml 5-Fu组,绘制生长曲线,计算细胞倍增时间。通过计算死亡细胞比例比较6组间细胞毒作用的强弱。结果:绘制出温化胶囊高效液相色谱指纹图谱,测得温化胶囊乌头碱含量为1.01±0.01μg。温化胶囊对MCF-7和T-47D细胞具有增殖抑制作用,其作用的强度与药物剂量呈正相关。细胞形态学观察发现,加入温化胶囊后两种细胞株的细胞质内均出现空泡样结构。随着药物作用时间的延长,空泡样结构的数量进行性增加,并可融合成大泡。流式细胞仪检查显示:与对照组相比,加药后S期细胞的比例显著升高。在第四阶段研究中,温化胶囊联合5-Fu组的增殖抑制作用强于其它各组,但联合药物组75μg/ml和
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