目的：携带绿色荧光蛋白报告基因RKIP质粒(pGFP－RKIP)稳定转染食管癌TE－13细胞，体外研究过表达RKIP对食管癌TE－13细胞增殖和迁移的影响。　　方法：　　1 RT-PCR方法检测四种食管癌细胞TE－2，TE－13，YES－2，YES－4中RKIPmRNA的表达水平，筛选出低表达细胞TE－13，进行RKIP质粒转染。　　2携带绿色荧光蛋白报告基因RKIP质粒(pGFP－RKIP)和空质粒(pGFP)转染食管癌细胞TE－13，经G418筛选后，进行RT-PCR和Western-blot方法鉴定，获得稳定转染空载体和过表达RKIP蛋白的细胞克隆。　　3应用平板克隆形成实验观察过表达RKIP对食管癌TE－13细胞克隆能力的影响。　　4用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测过表达RKIP对食管癌细胞TE－13增殖能力的的影响。　　5流式细胞术(FCM)检测过表达RKIP对食管癌细胞TE－13的细胞周期和凋亡的影响。　　6细胞划痕法检测过表达RKIP对食管癌细胞TE－13体外迁移能力的影响。　　结果：　　1食管癌细胞RKIP mRNA在TE－2，TE－13，YES－2，YES－4表达水平分别为1.254±0.057，0.537±0.004，1.187±0.008，1.162±0.007，TE－13表达水平最低。pGFP－RKIP质粒和空载体pGFP质粒转染人食管癌TE－13细胞，经G418筛选，获得稳定转染pGFP－RKIP细胞，以RT-PCR检测RKIPmRNA表达水平，在未处理组、pGFP组和pGFP－RKIP组的表达水平分别为0.201±0.023、0.384±0.012和1.211±0.028；经Western blot方法检测RKIP蛋白表达水平分别为0.401±0.005，0.389±0.006和1.501±0.004；结果显示，筛选出过表达RKIP的细胞株pGFP－RKIP，pGFP－RKIP细胞中RKIP mRNA和蛋白的表达均显著高于未处理组和空质粒对照组(P<0.05)，未转染组和空质粒对照组RKIP mRNA和蛋白的表达无明显差异(P>0.05)。　　2平板克隆形成实验结果显示：pGFP-RKIP质粒转染组的细胞克隆形成率43.50±1.87％显著少于pGFP质粒转染对照组78.83±2.78％，有显著性差异(P<0.05)。MTT结果示：从第2天开始，pGFP-RKIP质粒转染组细胞生长显著慢于pGFP空质粒对照组(P<0.05)。　　3 FCM示，pGFP-RKIP转染组细胞的凋亡率为0.91±0.14％，空质粒pGFP对照组细胞的凋亡率为0.73±0.12％，两组细胞凋亡率无显著性差异(P>0.05)。pGFP-RKIP转染组G0/G1期细胞比例为51.4±0.12％，明显高于空质粒对照组33.5±0.07％(P>0.05)，S期细胞pGFP-RKIP质粒转染组比例为31.5±0.10％，明显比空质粒对照组pGFP细胞50.48±0.12％减少，差异有显著性(P<0.05)。　　4平板单层细胞划痕实验显示，划痕12小时，pGFP-RKIP转染组细胞和pGFP空质粒对照组对照组细胞分别迁移27.8±1.7％和58.5±3.9％，划痕24小时分别迁移51.0±13.2％和94.1±2.6％，差异有显著性(P<0.05)。　　结论：　　1高侵袭性食管鳞癌TE-13细胞中RKIP mRNA表达水平低，提示RKIP的低表达可能与食管癌的发生，转移等恶性行为有关。　　2 RKIP基因成功转入食管癌TE-13细胞，筛选出过表达RKIP的细胞株pGFP-RKIP。RKIP基因转染后，食管癌TE-13细胞体外克隆形成率、增殖率、迁移速率明显降低，说明过表达RKIP能抑制TE-13食管癌细胞的体外增殖和细胞迁移，过表达RKIP将TE-13细胞阻滞于G0/G1期，影响细胞的周期，而对细胞凋亡无明显影响。