S-层蛋白（S-Layer Protein,SLP）是古细菌和真细菌表面由单分子蛋白或糖蛋白亚单位组成的晶格状结构，它位于细胞壁或细胞膜外层，以非共价键相互作用。通常可使用高浓度变性剂或离解剂（如尿素、盐酸胍、氯化锂、金属螯合剂及阳离子置换剂等）破坏S-层蛋白的氢键，使S-层蛋白解聚成单体而溶解出来，而去除变性剂后S-层蛋白亚基又能在多种基质中重新聚集成高度规则的晶格结构，即发生自组装效应。目前，对乳酸菌S-层蛋白研究较多的是粘附性，S-层蛋白可以介导乳酸菌粘附到各种宿主细胞表面。乳酸杆菌的S-层蛋白具有高度规则的晶格结构、显著的粘附能力和自我组装能力等优点，使其被广泛地应用于纳米生物技术、生物仿生学、生物医学以及异源蛋白质或多肽的高效表达或分泌性表达等方面。总之，它具有巨大的开发潜力和广阔的应用前景。　　本研究以已构建的载体pMD19T-slp为模板，应用PCR方法亚克隆slp基因，将其定点插入到原核表达载体pGEX-4T-3中，成功构建原核表达载体pGEX-slp。经IPTG诱导获得重组融合蛋白GST-SLP,应用SDS-PAGE和Western blot方法对其进行鉴定。然后用LiCl的方法进行纯化，应用ELISA和IFA方法鉴定纯度较高的重组融合蛋白GST-SLP的体外粘附性，这为进一步研究S-层蛋白质的生物特性以及开发和研制乳酸菌活载体基因工程疫苗奠定了基础。本研究结果如下：　　1.成功构建了原核表达载体pGEX-slp，应用SDS-PAGE和Western blot方法鉴定表达产物，证明了分子量大小约为71kDa的重组融合蛋白GST-SLP的存在，这与理论值相符。　　2.利用氯化锂的方法纯化重组融合蛋白，SDS-PAGE结果显示71kDa处有一条优势蛋白条带，经BCA试剂盒测定，该蛋白的浓度约为1.1mg/mL，这能够满足体外粘附性鉴定试验的需求。　　3.应用ELISA法对该重组融合蛋白的体外粘附性进行鉴定，结果显示：呈阳性，可初步证明当其浓度高时，与乳酸乳球菌NZ9000表面有较强的粘附作用；而当其浓度低时，粘附作用则较弱。　　4.应用IFA法对该重组融合蛋白的体外粘附性进一步鉴定，结果表明：该蛋白与乳酸乳球菌NZ9000和干酪乳杆菌的菌体表面均有一定的粘附作用。