长链非编码RNA-SRHC在肝癌中的表达和功能

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目的一、进一步了解肝癌中长链非编码RNA表达的改变及其临床意义。二、进一步了解长链非编码RNA在肝癌发生发展中的作用。方法一、从前期所做的高转移性肝癌和低转移性肝癌长链非编码RNA表达谱芯片中挑选一条在癌与癌旁有明显差异以及在高转移性肝癌和低转移性肝癌之间有差异表达的lncRNA。二、通过5’3’RACE实验得该长链非编码RNA的全长序列。三、从东方肝胆外科医院国家肝脏组织样本库挑选81例肝癌病人的癌组织及远端正常肝脏组织,利用实时定量PCR的方法检测该长链非编码RNA在这些样本中的表达,并分析表达量与各临床指标的相关性。四、运用甲基化测序等方法研究DNA甲基化对其表达的影响。五、包装过表达该长链非编码RNA的慢病毒,以此为工具通过体内体外的实验对其功能进行研究。结果一、该条新的未被研究过的长链非编码RNA(我们称之为SRHC,StrikinglyReduced in Hepatocellular Carcinomas)在肝癌中表达显著下调,在约80%的肝癌中表达低于对应的癌旁组织,在20%的肝癌组织未能检测到其表达。二、SRHC在大部分肝癌细胞系中表达极低或缺失(如SMMU-7721、HCCLM3)。三、SRHC有三种不同的剪切形式,剪切体1使其最主要的剪切形式。四、在81例肝癌病人中分析其表达量与临床病理特征的相关性显示SRHC的表达量与肝癌的分化程度(P=0.017)、甲胎蛋白(P=0.004)显著相关。五、在多种肝癌细胞系以及部分肝癌组织中,其基因启动子区域受到明显甲基化,抑制细胞的甲基化活动可以使其表达上调。六、体外实验表明SRHC可以抑制肝癌细胞增殖。结论SRHC是肝癌中潜在的非编码抑癌基因,其功能和作用机制有待进一步深入研究。
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