论文部分内容阅读
目的:通过检测程序性死亡受体1(Programmed death 1,PD-1)及程序性死亡配体1(Programmed death-ligand 1,PD-L1)在Ⅲa-N2期非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,分析两者与各临床病理特征的相关性,同时分析其与Akt、mTOR及HIF-1α蛋白之间的相关性,从而初步探索PD-1/PDL1通路促进NSCLC发生发展的相关机制,最后探讨两者在预后中的价值,用于寻找免疫治疗最佳获益人群及更为精确地指导Ⅲa-N2期NSCLC患者的治疗。方法:1.采用免疫组织化学染色技术检测102例Ⅲa-N2期NSCLC组织中PD-L1和PD-1的表达,并检测其中21例距肿瘤组织>5cm的癌旁组织标本中的PDL1和PD-1的表达作为对照组,分析两者与患者各临床特征之间的关系,并探讨两者在预后中的价值。2.采用IHC染色法检测102例Ⅲa-N2期NSCLC组织中Akt、mTOR及HIF-1α蛋白的表达,分析三者与各临床病理特征之间的关系,同时分析三者与肿瘤组织中PD-L1及PD-1表达的相关性,从而初步探索PD-1/PD-L1通路促进NSCLC发生发展的相关机制。结果:1.免疫组化结果显示,肺癌细胞中PD-L1阳性表达率为58.8%(60/102),癌间质细胞中PD-L1阳性表达率为65.7%(67/102)。肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor infiltrating lymphocyte,TILs)中PD1阳性表达率为45.1%(46/102)。而21例癌旁组织均无PD-L1和PD-1蛋白表达。TILs上的PD-1表达与肺癌细胞及间质细胞中的PD-L1表达均具有显著相关性(χ2=5.770,P=0.016;χ2=4.021,P=0.045)。2.肺癌细胞中的PD-L1表达与肿瘤位置(P=0.012)、N2淋巴结转移站数(P=0.000)、N2淋巴结阳性率(P=0.019)及隆突下淋巴结状态(P=0.000)具有显著相关性。TILs中的PD-1表达与T分期(P=0.037)、N2淋巴结转移站数(P=0.005)、N2淋巴结阳性率(P=0.000)显著相关。3.肺癌细胞中PD-L1表达阳性组和阴性组的5年OS分别为37.3%和60.3%,差异具有统计学意义(P=0.003);TILs中PD-1表达阳性和阴性患者的5年OS分别为37.9%和55.1%,差异达到统计学意义(P=0.046)。在DFS方面,PD-L1及TILs中PD-1表达阳性与阴性患者的5年DFS差异均无统计学意义(P=0.095;P=0.346)。4.亚组分析显示,肿瘤细胞中PD-L1表达在年龄≥65岁(P=0.004)、原发部位为右肺(P=0.021)、病理类型为鳞状细胞癌(P=0.035)或分期为T1(P=0.035)、T2(P=0.017)及T3期(P=0.000)的亚组患者中,与较差的OS显著相关。TILs中的PD-1表达在病理类型为鳞状细胞癌(P=0.003)、分期为T1(P=0.000)及T3期(P=0.000)、或N2淋巴结转移站数为单站(P=0.045)亚组患者中,对较差的OS有预测作用。5.全组患者中,Akt、mTOR及HIF-1α在NSCLC中的阳性表达率分别为72.5%、43.1%及82.4%。肺癌细胞中的PD-L1表达与Akt(χ2=4.062,P=0.044)、mTOR(χ2=4.322,P=0.038)及HIF-1α(χ2=5.863,P=0.015)表达均具有显著相关性。TILs中的PD1表达与Akt(χ2=4.257,P=0.039)、mTOR(χ2=4.293,P=0.038)及HIF-1α(χ2=4.620,P=0.032)表达均显著相关。6.全组102例NSCLC患者的1年、3年及5年DFS分别为37.3%,35.2%和30.2%,中位DFS为9.6个月;1年、3年及5年OS分别为82.3%,49.5%和47.2%,中位OS为35.1个月。单因素分析显示,N2淋巴结转移站数(P=0.014)、N2阳性淋巴结个数(P=0.009)、N2淋巴结阳性率(P=0.007)、隆突下淋巴结状态(P=0.000)、肺癌细胞中PD-L1(P=0.030)及TILs中PD-1表达(P=0.046)是影响患者OS的预后因素。多因素分析显示,仅有隆突下淋巴结状态是患者OS的独立影响因素(HR=2.364,95%CI:1.139-4.905,P=0.021)。结论:1.与癌旁组织相比较,PD-L1及PD-1在肺癌组织中存在过表达。肿瘤细胞中PD-L1与TILs中的PD-1表达呈显著正相关。2.肿瘤细胞中的PD-L1表达与肿瘤位置、N2淋巴结转移站数、N2淋巴结阳性率及隆突下淋巴结状态显著相关,提示PD-L1表达能够通过抑制抗肿瘤免疫反应来促进淋巴结转移,从而影响患者预后。PD-L1表达有助于预测Ⅲa-N2期患者的淋巴结转移模式,为Ⅲa-N2期NSCLC的分层治疗提供了相关依据。3.肿瘤细胞中的PD-L1与Akt、mTOR和HIF-1α之间存在着协同表达,提示PD1/PD-L1可能能够通过影响Akt/mTOR和HIF-1α通路来促进非小细胞肺癌的发生发展,联合阻断PD-1/PD-L1通路及Akt/mTOR或HIf-1α通路可能可作为肿瘤免疫治疗的一种新策略。4.肿瘤细胞中PD-L1或TILs中PD-1的阳性表达是影响患者总生存的不良预后因素,PD-L1及PD-1可作为Ⅲa-N2期NSCLC患者个体化治疗的新型标志物。