大株红景天注射液对大鼠脊髓损伤作用的实验研究

来源 :华北理工大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:gxp_crysta1
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目的本实验的目的是探讨在雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠中使用动脉夹钳夹脊髓法制作急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型的可行性,并在腹腔内注射大株红景天注射液(Radix Rhodiolae injection),研究大株红景天对该模型在运动学、氧化应激反应以及神经细胞恢复方面的影响。方法36只2月龄雄性SD鼠(200g±10g)随机分为3组:对照组(Sham组)12只、模型组(SCI组)12只和实验组(给药组)12只。Sham组、SCI组和给药组分别进行双侧椎板切除术(T10椎体),SCI组和给药组进行动脉夹钳夹T10椎体对应高度脊髓3秒,术后给药组给予腹腔注射大株红景天注射液(10mg/kg·d),SCI组和sham组给与同等量生理盐水腹腔注射,第3天每组随机选取6只处死并收集标本进行相关氧化应激指标测定,给药组剩余6只继续给药直至第7天,同样SCI与sham组剩余大鼠继续给予同等量生理盐水注射。标准环境下饲养至第14天全部处死进行4%多聚甲醛体内灌注并取脊髓标本,将所取标本放入20%蔗糖溶液中浸泡24小时脱水(4℃下),直至组织完全沉底。将脱水标本进行包埋冰冻切片进行HE染色观察损伤以及恢复的大体情况,进行免疫组织化学染色,检测神经细胞存活和恢复情况。在术前(0天)及术后1、3、5、7、10、14天对大鼠进行改良Tarlov评分,评估后肢运动恢复情况。收集各组数据进行统计学分析。结果1 SCI组与Sham组相比,损伤区域神经细胞核肿胀坏死凋亡,出现囊泡状软化灶坏死,再生轴突结构紊乱,胶质细胞产生无效瘢痕增多,灰质与白质之间分界不清;改良Tarlov评分显著降低(P<0.05);氧化应激指标测定:超氧化物歧化酶(SOD)含量显著减少(P<0.05),谷胱甘肽(GSH)含量显著减少(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著增多(P<0.05),一氧化氮(NO)含量略微增加(P>0.05);免疫组化测定:神经丝蛋白200(neurofilament protein 200,NF200))标记的新生神经元数量明显减少(P<0.05),生长相关蛋白-43(GAP-43)标记轴突再生结构紊乱,无效增生增多。2经过大株红景天注射液干预,给药组与SCI组相比较损伤区域神经细胞核肿胀情况改善明显,囊状软化灶减小,再生轴突结构有序,相互支持,无效瘢痕减少;改良Tarlov评分明显增加(P<0.05),氧化应激指标测定:超氧化物歧化酶(SOD)含量显著增多(P<0.05),谷胱甘肽(GSH)含量显著增多(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著减少(P<0.05),一氧化氮(NO)含量略微减少(P>0.05);免疫组化测定:神经丝蛋白200(neurofilament protein 200,NF200))标记的新生神经元数量明显增加(P<0.05),生长相关蛋白-43(GAP-43)标记轴突结构比较清晰,无效增生明显减少。结论大株红景天注射液能够改善SCI的继发性氧化应激反应,促进SCI模型后肢运动功能恢复,减少损伤区域神经细胞水肿凋亡情况,能够有效诱导轴突重塑,促进神经细胞恢复。图5幅;表6个;参117篇。
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