E(spl)和CG7510基因对果蝇天然免疫的作用

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天然免疫系统是多细胞生物抵抗各种入侵微生物的第一道防线。Notch途径介导相邻细胞之间的相互作用,调节细胞、组织、器官的分化和发育。为了进一步探索Notch信号途径在果蝇天然免疫中的功能,利用Notch途径下游基因E(spl)和Su(H)的低表达突变体果蝇,通过体外注射病原体分析了生存率,鉴定了血细胞的噬菌功能、抗菌肽的表达量,以及突变体血细胞的数量。结果表明,革兰氏阴性细菌和真菌感染时E(spl)突变体的生存率、噬菌能力及抗菌肽的表达量明显降低,而且幼虫期血细胞出现异常增殖;Su(H)突变体只对真菌表现出敏感性,抗菌肽的表达量降低,但是对真菌的噬菌能力正常。此结果表明,Notch途径不仅影响个体的生长发育,而且在果蝇天然免疫中也起重要的调节作用。  CG7510是一种孤儿G蛋白偶联受体(GPCRs),与哺乳动物G蛋白偶联受体G155具有40%以上的同源性。随着GPCRs的研究,其作为药物靶点成为寻找治疗疾病药物的新手段。在我们过去的研究中发现CG7510低表达的突变体注射病原体后生存率明显降低。为了进一步研究CG7510基因在天然免疫中的功能,利用CG7510低表达突变体果蝇,分析了CG7510突变体mRNA的表达量和血细胞肌动蛋白的分布,通过三龄幼虫注射带有绿色荧光标记的病原体鉴定了血细胞的噬菌作用。结果显示突变体中CG7510 mRNA表达量为野生型果蝇的30%左右,血细胞的肌动蛋白分布表现为伪足的短、小,且分布不均匀;而且突变体幼虫血细胞对革兰氏阳性菌和真菌表现出敏感性,但对于革兰氏阴性菌的吞噬作用正常。为了进一步深入探究CG7510基因在天然免疫中的功能,利用P因子切除技术构建了几个新的CG7510突变体,其mRNA表达量低于P因子插入突变体,从而为进一步深入研究CG7510蛋白的功能及调控机制提供了研究基础。
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