【摘 要】
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目的:口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是口腔恶性肿瘤中最常见的组织学类型,由于口腔鳞癌容易发生淋巴结转移,使口腔鳞癌患者的治疗及预后效果不佳,因而受到研
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目的:口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是口腔恶性肿瘤中最常见的组织学类型,由于口腔鳞癌容易发生淋巴结转移,使口腔鳞癌患者的治疗及预后效果不佳,因而受到研究者们的高度重视。肿瘤干细胞被认为是导致肿瘤难治的原因之一。本课题将通过对口腔鳞癌组织中肿瘤干细胞标记物CD133蛋白的检测,分析口腔鳞癌肿瘤干样细胞的相关特性,并初步研究口腔鳞癌CD133~+肿瘤干样细胞与淋巴管生成的关系及其中可能的机制,拟为改善口腔鳞癌患者的治疗及预后效果,提供新的方向。方法:1.收集口腔鳞癌石蜡组织标本163例、正常口腔黏膜组织标本37例。用免疫组织化学技术检测肿瘤干细胞标记物CD133在口腔鳞癌组织及正常口腔黏膜组织中的表达情况,分析其表达与患者临床病理参数的关系及在口腔鳞癌患者预后判断中的价值。2.免疫组织化学技术检测口腔鳞癌组织及正常口腔黏膜组织中VEGF-C蛋白的表达情况,分析其临床病理参数及与CD133蛋白表达之间的关系。3.免疫组织化学技术检测口腔鳞癌组织及正常口腔黏膜组织中Podoplanin蛋白的表达,并根据表达情况,计算出组织中的淋巴管密度,再分析淋巴管密度与CD133蛋白表达的关系。4.通过体外细胞实验,运用Western-blot及qPCR技术检测CD133~+SCC9人舌鳞癌细胞在经过重组人VEGF-C的诱导分化培养后其淋巴管内皮细胞标记物(LYVE-1、Podoplanin、VEGFR-3)在蛋白及基因层面上表达的变化情况,探究口腔鳞癌CD133~+肿瘤干样细胞与淋巴管生成的关系及可能的机制。结果:1.CD133蛋白在口腔鳞癌组织中的表达率高于正常口腔黏膜组织(P<0.05),其表达水平与口腔鳞癌患者的临床分期、肿瘤的分化程度、淋巴结转移及患者的预后有关(P<0.05),CD133蛋白可能是影响口腔鳞癌患者预后的独立因素。2.口腔鳞癌组织中VEGF-C蛋白的表达率及淋巴管密度均高于正常口腔黏膜组织(P<0.05),二者均与口腔鳞癌患者的临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05)。3.口腔鳞癌CD133蛋白阳性组的VEGF-C蛋白表达率及淋巴管密度均高于CD133蛋白阴性组(P<0.05)。4.CD133蛋白与VEGF-C蛋白的表达强度呈正相关(P<0.05)。5.CD133~+SCC9人舌鳞癌细胞在重组人VEGF-C的诱导分化培养下,其淋巴管内皮细胞标记物(LYVE-1、Podoplanin、VEGFR-3)在蛋白及基因水平的表达均上升(P<0.05)。结论:1.在口腔鳞癌组织中CD133蛋白的表达高于正常口腔黏膜组织,并且其表达水平与口腔鳞癌的淋巴结转移及患者的预后密切有关,并可能是影响口腔鳞癌患者预后的独立因素。2.在口腔鳞癌组织中VEGF-C蛋白的表达水平及淋巴管密度均高于正常口腔黏膜组织,且均与CD133蛋白的表达相关,提示CD133~+口腔鳞癌肿瘤干样细胞可能与淋巴管生成有关,并且VEGF-C蛋白可能参与调节该过程。3.CD133~+口腔鳞癌肿瘤干样细胞经过重组人VEGF-C的诱导分化培养后,可能逐渐向淋巴管内皮细胞分化。
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