四溴双酚A-双-(2,3-二溴丙基醚)对秀丽隐杆线虫氧化应激与神经毒性的作用研究

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目的:四溴双酚-A-双-(2,3-二溴丙基醚)(TBBPA-BDBPE)是四溴双酚A的一个衍生物,同时作为一个添加式溴化阻燃剂而广泛地使用于电子设备和建筑材料中,其使用率也呈现了逐渐上升的趋势。TBBPA-BDBPE可经由制造、使用或拆解等过程释放到周围环境中,目前已经在多种环境介质中检测出TBBPA-BDBPE的赋存,甚至在动物源性食物中检出TBBPA-BDBPE,说明该类阻燃剂可通过多个途径对人体产生暴露。然而目前对于环境中检出的TBBPA-BDBPE的毒性研究较少,有限研究的开展主要集中在水生生物、哺乳动物等模式生物中进行,且毒性结果主要来自高剂量毒性暴露实验,无法反应TBBPA-BDBPE实际环境浓度暴露下的健康风险。因此本研究利用秀丽线虫的优势对TBBPA-BDBPE的毒性效应及其作用机理进行研究,以期为环境安全相关政策的制定提供毒理学参考。研究方法:本论文以TBBPA-BDBPE为外源污染物,秀丽线虫为受试动物,从生理水平(寿命、体长、头部摆动频率、身体弯曲频率和产卵率)、生化水平(ROS水平和脂褐素累积水平)和分子水平(相关转基因线虫相对荧光强度和相关基因的表达水平)三个层次研究TBBPA-BDBPE急性暴露对秀丽线虫的毒性效应及其作用机理,研究内容包括:TBBPA-BDBPE暴露对秀丽隐杆线虫的氧化应激作用;TBBPA-BDBPE暴露对秀丽隐杆线虫的神经毒性作用。结果:1.急性暴露于1~100μg/L TBBPA-BDBPE可显著损伤秀丽线虫的寿命;急性暴露于100μg/L和10μg/L TBBPA-BDBPE分别显著降低秀丽线虫的产卵率和体长;急性暴露于1μg/L TBBPA-BDBPE显著增加秀丽线虫体内脂褐素累积水平;急性暴露于10μg/L和1μg/L TBBPA-BDBPE分别显著增加秀丽线虫体内ROS和gst-4::GFP的相对荧光强度;TBBPA-BDBPE急性暴露显著影响秀丽隐杆线虫氧化应激相关基因的表达水平,其中sod-1、sod-3和clk-1的表达水平发生极显著变化;用抗坏血酸处理后,秀丽线虫的寿命、ROS和脂褐素积累水平恢复到对照水平;2.急性暴露于1μg/L和10μg/L TBBPA-BDBPE分别显著降低秀丽线虫头部摆动频率和身体弯曲频率;急性暴露于0.1μg/L和100μg/L TBBPA-BDBPE分别致使GABA能与5-羟色胺能神经元的相对荧光强度显著降低;TBBPA-BDBPE急性暴露组的GABA和5-羟色胺神经递质的含量显著高于对照组;TBBPA-BDBPE急性暴露显著影响了秀丽线虫神经递质相关基因的表达水平,其中cat-4、unc-25和tph-1等基因表达发生极显著改变。结论:1.TBBPA-BDBPE急性暴露影响秀丽线虫ROS、脂褐素累积和氧化应激相关基因表达水平,进而引起氧化应激;2.TBBPA-BDBPE急性暴露通过影响GABA与5-羟色胺的神经传递途径对秀丽线虫造成神经毒性。
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