芒果炭疽病菌拮抗酵母的筛选、鉴定及其保护剂的评价

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炭疽病在采前和采后危害芒果,造成很大的产量和品质损失,是芒果生产上的重要病害之一,其病原菌主要为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides(Penz)Penz.&Sacc.)。长期以来,该病害的田间防治主要依赖化学杀菌剂,随着苯并咪唑类化学药剂的长期大量使用,胶孢炭疽菌已经对该类杀菌剂产生了抗药性,使得防效下降。病原菌的潜伏侵染会造成芒果在采后流通过程中的大量损失,采后炭疽病的防治也需要化学药剂,随着人们对环境保护和食品安全越来越重视,研发更加安全、环保的芒果炭疽病采前采后防治新技术,如生物防治,显得更加迫切。在生防菌中,由于酵母具有抗逆性强、能在营养贫瘠的条件下生长、繁殖快速、不产生抗生素、受杀虫剂影响较小等优点,逐渐成为研究的热点。本研究旨在筛选出有潜力防治芒果炭疽病的酵母菌株并鉴定其种类,初步了解其生防机理,探索制作生防酵母的液体生防制剂的可能性。主要结果如下:1.直接用芒果离体叶片接种法,从芒果果实上筛选到一株对芒果炭疽病有较强抑制作用的酵母菌株4-4A,在芒果离体叶片上的防治效果可达75%。2.通过形态观察和生理生化指标测定,并结合rDNA-ITS序列分析,对酵母菌4-4A进行了初步鉴定。结果表明:酵母菌4-4A属于季也蒙毕赤酵母(Pichia quilliermondii)。3.对生防酵母的作用机理进行了初探。实验发现,用1×108CFU/ml浓度的酵母悬浮液拮抗效果好于低浓度和对照处理;光学显微镜下可观察到酵母菌吸附于炭疽菌菌丝;与炭疽菌对峙培养时可以观察到明显的抑菌带,酵母菌可产生挥发性物质抑制炭疽菌生长;酵母菌对炭疽菌分生孢子萌发有抑制作用。初步推断拮抗菌P. quilliermondii的生防机理包括营养和空间的竞争、产生抑菌性物质以及酵母菌对炭疽菌菌丝和分生孢子的直接作用。4.以蔗糖、海藻糖和半乳糖为保护剂,制备了酵母生防菌的液体剂型,并测定了3个月内保存于不同温度下液体剂型中酵母菌的存活率。结果显示,海藻糖作为保护剂保护效果最好,在-20℃下保存3个月后酵母存活率可达54%,10℃和4℃下保存2个月存活率为52%和56%,其次为半乳糖,蔗糖的保护效果最差。加入抗坏血酸可以增强保护剂的保护效果。
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