烟草叶色突变体yl2的农艺性状调查和生理生化分析

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烟草是重要的经济作物之一,光合作用显著影响其物质积累和产质量。叶绿素是光合作用中最重要的色素,对叶绿素积累基因的定位和克隆将为色素相关的遗传机制研究和高光效育种提供理论和材料支持。本研究通过对EMS诱变中烟100(ZY100)产生的一个叶片提前黄化突变体yl2的表型、生理生化研究、衰老Marker基因表达分析、F2群体遗传分析和初定位研究,分析了叶色异常表型下的生理生化、分子调控机制及定位信息,结果如下:对移栽后多个时期的叶色突变体yl2的农艺性状进行调查表明,yl2整株叶片颜色明显比对照同部位叶片浅,移栽后58 d左右中下部叶开始呈现明显黄化表型,比对照植株提前17 d左右出现落黄;叶片提前黄化同时影响了其生长发育,yl2在株高、茎围、节距、叶片数、最大叶长及最大叶宽等各项农艺指标上都显著低于对照。对移栽后多个时期和部位的烟叶进行叶绿素含量、叶绿素荧光参数、蛋白质含量、离子渗漏率的检测,结果表明,整个大田期,yl2叶绿素含量、叶绿素荧光参数和蛋白质含量均低于同时期对照ZY100,yl2和对照的叶绿素含量、叶绿素荧光参数和蛋白质含量均随着移栽时间推移先增大后减少,但yl2的叶绿素含量及其叶绿素荧光参数的最高值出现在50 d,比对照提前了15 d,yl2蛋白质含量与对照在同时期出现最高值;yl2的离子渗漏率在各个时期均高于对照ZY100,移栽后65 d时与对照间的差异最大。对yl2中衰老相关的基因SAG12和RBCS进行转录水平检测的结果表明,大田期各时期yl2中SAG12的表达量均高于同时期对照ZY100;RBCS的表达量均低于同时期对照ZY100。yl2突变体的衰老程度明显高于对照,YL2基因可能与SAG12和RBCS参与了相同的进程,共同调控着叶片衰老。对yl2与翠碧一号(CB-1)、yl2与革新三号(GX-3)分别杂交构建的两个F2代分离群体进行遗传分析表明,F1代植株均呈现正常表型,F2代植株正常表型和提前黄化表型植株分离比为3:1,说明提前黄化表型是由一对隐性细胞核基因控制。利用图位克隆技术对YL2基因进行初定位,结果表明YL2基因位于第24号连锁群上,与SNP标记C19-10、C19-7分别间隔12 c M和15 c M,定位结果为YL2基因的进一步精细定位和克隆提供了研究基础。
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