液相色谱-质谱联用(LC-MS)方法具有灵敏度高、选择性好、准确性与重现性好等优点，故目前很多代谢动力学的研究都采用这种技术对目标物质进行分离和分析。以构建适用于药代动力学研究的LC-MS方法并用于药代动力学研究为主要内容，本论文的工作可分为三部分，分别集中在LC-MS方法分离检测几种生理活性物质的方法学研究，离子液体盐溶液双水相萃取处理生物样的的研究，以及几类生理活性物质的代谢与反应动力学研究方面。 第一部分液相色谱．质谱分离测定几种生理活性物质的方法学研究第二章：建立了生物样品中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的前处理与LC-MS分离检测方法，并讨论了这类化合物在不同的LC-MS接口和不同定量模式的方法学参数。建立了适用于人血清等复杂生物样品处理的固相萃取方法。同时对吴茱萸碱的二级质谱碎片结构和碎裂机制进行了解析。 第三章：应用液相色谱．大气压化学电离质谱(LC-APCI-MS/MS)方法，建立了十四种甾体激素的分离检测方法，并对这类化合物的离子化机理进行了探讨。研究了不同种类和浓度的离子化助剂、流动相中的铵根离子对MS响应的影响，探讨了共流出峰相互之间的离子化抑制行为。 第四章：使用手型LC柱，对四种烟草特有的亚硝胺类成分NNN，NAT，NNAL和iso-NNAL进行了手性拆分和LC-MS检测。在实验中，对手性分离的色谱模式选择、流动相缓冲盐选择、离子浓度和pH值的确定以及分离的温度进行了系统优化，最后建立起同时分离检测4对手性异构体的LC和LC-MS方法。 第二部分几种生理活性物质的离子液体盐溶液双水相萃取研究第五章和第六章：使用离子液体-盐溶液双水相萃取体系，对十三种磺胺类物质和六种烟草特有亚硝胺类化合物的萃取进行了研究。并进一步优化了相应的MS条件，证明这种前处理方法正确使用时可以和LC-MS兼容。 第三部分液相色谱一质谱在代谢动力学和反应动力学研究中的应用第七章：建立了生物样品中TSNAs的手性分离、MS检测方法以及固相萃取样品处理流程。研究了NNN，NAT，NAB，NNAL，NNK在家兔体内的代谢与转化；NNAL的手性异构体在家兔体内的代谢、非手性分子NNK在家兔体内向NNAL不同手性异构体的转化和(-)-NNAL向(+)-NNAL的转化；以及NNN和NAT的手性异构体在家兔体内的代谢。在得到药代动力学曲线之后，建立了其中部分化合物代谢的动力学模型，并对模型代表的化学机制与机理进行了探讨。 第八章：使用LC-MS方法对反-白藜芦醇的长期热稳定性及光致顺反异构化反应进行了研究。研究了反-白藜芦醇的异构化和其余几个副反应的机理。证明了白藜芦醇的顺反异构化是通过一个p-态完成的；而另外几个副反应则是通过自由基历程完成的。