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沙棘(Hippohae rhamnoides L.)是一种天然的药食同源性植物,属于胡秃子科(Elaeagnaceae)沙棘属(Hippophae),沙棘的根、茎、叶、花、果实均含有丰富的营养和生物活性物质。此外,沙棘籽蛋白质含量丰富,是一种很好的植物蛋白资源。沙棘资源广泛分布于欧亚地区,我国是沙棘资源最丰富的国家,主要分布于西南、西北和华北等地。本文以沙棘籽为原料,采用石油醚脱脂、乙醇去黄酮与原花青素,碱提酸沉的方法制备沙棘籽蛋白,同时研究了沙棘籽蛋白对糖尿病小鼠的降血糖作用、对炎症因子的干预作用以及对相关基因表达的影响,并对其功效、机制进行了探索,为沙棘籽蛋白产品的开发利用提供理论依据。本研究以沙棘籽为原料制备沙棘籽蛋白,蛋白质全自动测定仪测定沙棘籽蛋白含量及其得率。氨基酸全自动分析仪测定沙棘籽蛋白氨基酸成分。利用高脂饮食结合化学试剂诱导得到2型糖尿病小鼠实验模型,以沙棘籽蛋白、沙棘多糖和沙棘原花青素进行灌胃处理4周,研究其对糖尿病小鼠体重(BW)、空腹血糖(FBG)、血脂、血清胰岛素(SIN)的影响以及对糖尿病小鼠胰岛素抵抗的改善作用；用酶联免疫双抗体夹心法检测小鼠血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-a (TNF-α)核因子-κB (NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)水平,检测小鼠肝脏AMP激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)、沉默信息调节因子1 (Silent information regulator 1, Sirtl)活性；用半定量RT-PCR (sqRT-PCR)的方法研究沙棘籽蛋白对糖尿病小鼠肝脏葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase, G-6-P),糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β)、肉碱棕榈酰基转移酶-1(carnitine palmitoyl transferase 1-α, CPT1-a)、糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase, GP)基因表达的影响。结果显示,采用碱提酸沉的方法制备沙棘籽蛋白的含量为70.1%,总提取率为36.5%,氨基酸种类齐全,必需氨基酸组成比例均匀。动物实验结果显示,沙棘籽蛋白、沙棘多糖和沙棘原花青素处理组小鼠空腹血糖、总甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均显著低于模型组(p<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素敏感指数显著高于模型组(p<0.05),血清胰岛素水平和胰岛素抵抗指数(IRI)显著低于模型组(p<0.05)；沙棘籽蛋白、沙棘多糖和沙棘原花青素处理组小鼠血清炎症因子水平均显著低于模型组(p<0.05),小鼠肝脏AMPK、 Sirtl活性均显著高于模型组(p<0.05)。各组小鼠RT-PCR结果显示,沙棘籽蛋白、沙棘多糖和沙棘原花青素各剂量组G-6-P, GSK-3β, CPT1-α和GP mRNA表达水平均低于模型组。本研究结果表明,沙棘籽蛋白具有降低2型糖尿病小鼠的体重的功效,具有改善小鼠高血脂和高血糖症状的功效。Elisa实验证明,沙棘籽蛋白能够改善2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗及炎症因子水平,提高AMPK、Sirt1活性的功效.sqRT-PCR结果显示沙棘籽蛋白能够抑制G-6-P、GsK-3β、cPT1-α和GP等基因的表达。其作用机制可能与增强AMPK、Sirt1活性,抑制G-6-P、GsK-3β、cPT1-α和GP等基因表达有关。说明沙棘籽蛋白能够有效预防和控制2型糖尿病的发生。