在端粒酶缺失酵母细胞中筛选影响端粒DNA重组因子的研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guobinlei
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端粒是真核生物染色体末端由端粒DNA及其结合蛋白组成的一种高级结构,在维持基因组稳定性中起重要作用。端粒DNA的延伸主要通过端粒酶完成。在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中,缺失端粒酶的细胞将逐渐衰亡,但极少数细胞(幸存子)能够通过依赖于Rad52的同源重组机制延伸端粒,从而逃过生存危机。幸存子按照端粒及亚端粒DNA结构的显著差异能够分成I型和II型两类,Rad50和Rad51分别划分了这两种幸存子产生的两条经典途径,但具体机制目前仍然不甚明晰。为了揭示两种幸存子产生的调控机制,在280个端粒维持基因缺失的细胞中敲除端粒酶亚基TLC1,进而筛选影响幸存子产生的基因。分别通过检测在液体和固体培养基中传代培养产生幸存子的类型,筛选得到了10个显著影响Ⅰ型幸存子产生的基因和22个Ⅱ型幸存子产生的必需基因。这些基因除了参与端粒长度的调控,还涉及了其它的多个生命过程,如组蛋白修饰,染色质重组,RaNA剪切与降解,蛋白质泛素化等。其中,进一步研究表明PIF1是Ⅰ型幸存子产生必需的,而包括CG1121和KAE1在内的KEOPS复合物是Ⅱ型幸存子产生所必需的。工作对于揭示端粒酶缺失的酵母细胞中端粒DNA重组的调控过程提供了重要线索。  
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