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本研究以初始质量为(10.00±0.22)g/尾的洛氏鱥(Rhynchocypris lagowskii)为研究对象,将0、1.0×10~6、1.0×10~7、1.0×10~8、1.0×10~9 CFU/m L五个不同浓度的洛氏鱥源解淀粉芽孢杆菌LSG2-8(Bacillus amyloliquefaciens)采用喷涂的方式添加到饲料中,配制成5种不同的试验饲料,进行8周的养殖试验。在养殖试验结束后,采用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)对洛氏鱥进行14天的攻毒试验。本研究通过探讨解淀粉芽孢杆菌LSG2-8对洛氏鱥生长、免疫和肠道健康的影响,为合理开发洛氏鱥专用益生菌饲料和洛氏鱥的健康高效养殖技术提供理论依据和技术参考。本试验包括三个部分,结果如下:1、解淀粉芽孢杆菌LSG2-8对洛氏鱥生长、消化酶活性和肌肉营养成分的影响由本试验结果可知:在养殖中期,与对照组相比,在饲料中添加解淀粉芽孢杆菌LSG2-8对洛氏鱥的生长性能、饲料效率、肌肉中水分、粗灰分和粗脂肪含量均无显著影响;D-6、D-7和D-8组洛氏鱥肌肉中粗蛋白含量较对照组显著增高(P<0.05)。在养殖末期,D-6、D-7、D-8和D-9组洛氏鱥的终末体重、增重率、特定生长率、饲料效率以及肌肉中粗蛋白质含量均显著高于对照组(P<0.05),其中D-8组效果最优。但饲料中解淀粉芽孢杆菌LSG2-8对洛氏鱥的肥满度、肝体比、脏体比、肠长指数和肠体指数以及肌肉中水分、粗灰分和粗脂肪含量无显著影响(P>0.05)。肠道消化酶活性检测结果显示:在养殖中期,与对照组相比,各处理组洛氏鱥胰蛋白酶活性和淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05),而脂肪酶、Na+,K+-ATP酶和γ-谷氨酰转移酶活性无显著变化(P>0.05)。在养殖末期,与对照组相比,各处理组洛氏鱥胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、Na+,K+-ATP酶和γ-谷氨酰转移酶活性均显著增高(P<0.05),其中D-7组和D-8组作用效果较好。2、解淀粉芽孢杆菌LSG2-8对洛氏鱥抗氧化能力和免疫力的影响由抗氧化酶活性检测结果可知:在养殖中期,各处理组洛氏鱥的过氧化氢酶活性均高于对照组(P<0.05),且各处理组洛氏鱥的丙二醛含量均显著低于对照组(P<0.05),总超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性较对照组无显著性变化(P>0.05)。在养殖末期,与对照组与相比,各处理组洛氏鱥的总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著增高(P<0.05),各处理组洛氏鱥的丙二醛含量均显著下降(P<0.05),其中D-7组和D-8组效果较好。抗氧化基因表达量结果显示,各处理组洛氏鱥的Keap-1m RNA表达量和Nrf-2 m RNA表达量均显著高于对照组(P<0.05),其中D-8组效果较好。免疫相关酶活性试验结果显示:解淀粉芽孢杆菌LSG2-8对洛氏鱥抗氧化能力和免疫力有显著的影响(P<0.05)。在养殖中期,各处理组洛氏鱥的溶菌酶活性均显著高于对照(P<0.05),而碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性较对照组无显著变化(P>0.05)。在养殖末期,与对照组相比,各处理组洛氏鱥的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和溶菌酶活性均显著增高(P<0.05),其中D-7组和D-8组作用效果较好。免疫基因表达量检测结果表明:各处理组洛氏鱥的IL-1βm RNA和IL-8 m RNA表达量均显著低于对照组(P<0.05),其中D-8组效果较好。各处理组洛氏鱥的IL-10 m RNA和TGF-βm RNA表达量均显著高于对照组(P<0.05),其中D-8组效果最好。由抗病力试验结果可知,D-6(60.7%)、D-7(40.5%)、D-8(36.5%)和D-9(50.2%)洛氏鱥的死亡率均显著低于对照组(70.6%)(P<0.05),其中D-8组洛氏鱥的死亡率最低。D-6、D-7、D-8和D-9组洛氏鱥的溶菌酶活性及补体C3、补体C4和免疫球蛋白M的含量均显著高于对照组(P<0.05),其中D-8组作用效果最为显著。3、解淀粉芽孢杆菌LSG2-8对洛氏鱥肠道健康的影响由肠道石蜡切片结果可知,解淀粉芽孢杆菌LSG2-8对洛氏鱥肠道组织结构有显著影响(P<0.05)。各处理组洛氏鱥前肠、中肠和后肠的组织结构清晰完整、肠绒毛发达、黏膜清晰,无脱落现象。其中,D-8组洛氏鱥肠道的皱襞高度、固有层宽度和肌肉层厚度显著高于对照组(P>0.05)。由肠道屏障基因检测试验结果可知,与对照组相比,各处理组洛氏鱥的Claudin-3 m RNA表达量和ZO-1 m RNA表达量均显著高于对照组(P<0.05),其中D-8组作用效果较好。由肠道菌群多样性检测结果可知:各试验组肠道菌群多样性的测序结果基本覆盖了洛氏鱥肠道内所有的微生物,并且各样本之间共享的OTU比例较高。变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Phylum Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroides)和放线菌门(Actinobacteria)是洛氏鱥肠道中的优势种群。在属水平上,肠道主要菌群有芽孢杆菌属(Bacillus)和巨大牙殖杆菌属(Gemmobacter)。并且在饲料中添加解淀粉芽孢杆菌LSG2-8可以降低洛氏鱥肠道中免疫系统疾病微生物的相对丰度,增加氨基酸、碳水化合物、能量以及维生素代谢微生物的相对丰度。综上所述,在饲料中添加浓度为1.0×10~7~1.0×10~8CFU/g的解淀粉芽孢杆菌LSG2-8能够提高洛氏鱥的生长性能和免疫力,改善洛氏鱥的肠道健康。