【摘 要】
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黄曲霉毒素B1（AFB1）是毒性极强的生物致癌剂,对肝脏组织的破坏性极强,经常接触会导致慢性中毒,有诱发癌症的风险。AFB1容易在高温和潮湿的环境中滋生,污染粮食作物及农畜产品。近年来,我国食药监管局对市场上的谷物、粮油等食品进行抽检时,常有AFB1检出量超标的情况。AFB1一旦滋生难以通过日常的烹饪去除,因此需开发出能快速、灵敏对AFB1进行现场检测的方法来预防中毒事件的发生。侧流层析技术是一种
【基金项目】
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安徽省自然科学基金项目（项目编号:1908085MB54）；
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黄曲霉毒素B1（AFB1）是毒性极强的生物致癌剂,对肝脏组织的破坏性极强,经常接触会导致慢性中毒,有诱发癌症的风险。AFB1容易在高温和潮湿的环境中滋生,污染粮食作物及农畜产品。近年来,我国食药监管局对市场上的谷物、粮油等食品进行抽检时,常有AFB1检出量超标的情况。AFB1一旦滋生难以通过日常的烹饪去除,因此需开发出能快速、灵敏对AFB1进行现场检测的方法来预防中毒事件的发生。侧流层析技术是一种耗时短、操作简便的可视化检测技术,本研究基于竞争法的抑制机理,以碳纳米管代替胶体金来标记抗体,构建了可现场检测AFB1的高灵敏度侧流层析试纸条,并评价其性能。（1）优化碳纳米管标记的侧流层析试纸条的制备条件。首先,酸化多壁碳纳米管（MWCNTs）,制备出MWCNTs和AFB1抗体的偶合物。优化后的MWCNTs酸化条件为:使用30-50 nm的MWCNTs在5.4 mL浓硫酸和1.8 mL浓硝酸中超声反应3小时。选择EDC、NHS活化法与AFB1单克隆抗体相连,确定MWCNTs-McAb偶合物中抗体的添加量为20 μg/mL,缓冲液中PVP的添加量为1%,选择170 s膜作为试纸条NC膜的材料,并在NC膜上喷划浓度为2.5 mg/mL的AFB1-BSA作为试纸条的检测线。（2）进一步探究试纸条的分析特性,结果表明本研究构建的试纸条在最优条件下有很高的灵敏度,肉眼可检测到0.25 ng/mL的AFB1,对0.005-0.5 ng/mLAFB1的检测结果有着良好的线性关系,线性回归方程为y=34.615x+0.6803,计算出的最低检测限为0.0052 ng/mL,且不与其他毒素产生交叉反应,多次检测结果一致性高,能在室温下保存两个月不变质。因此该试纸条具备优良的分析性能,可以满足对AFB1的快速现场检测要求。
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