目的:基于中医理论“肾主骨生髓”初步探讨淫羊藿苷介导mi RNA调控骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化作用机制,为临床治疗骨折延迟愈合与不愈合提供新的思路和实验依据。方法:从基因表达综合(GEO)数据库筛选与大鼠骨折愈合相关的基因芯片。下载数据集原始数据并做稳健多阵列平均(RMA)标准化处理,提取并分析双特异性磷酸酶1(DUSP1)m RNA表达量。采用mi RDB、Diana-micro T和Target Scan数据库预测与DUSP1 m RNA特异性结合的mi RNA,运用生物信息学方法建立mi RNA调控机制假说。通过CCK-8细胞增殖实验筛选最佳浓度淫羊藿苷,碱性磷酸酶(ALP)活力检测分析淫羊藿苷促进大鼠BMSCs的成骨效应。采用Western blotting和RT-q PCR分析淫羊藿苷促进大鼠BMSCs成骨分化的过程中成骨相关转录因子(OSX)、骨钙蛋白(OCN)、目标基因DUSP1和mi RNA的表达,以及过表达mi RNA的大鼠BMSCs中目标基因DUSP1的m RNA与蛋白表达。并采用双荧光素酶报告实验分析mi RNA与DUSP1 m RNA的靶向结合关系。结果:1.通过挖掘GSE594数据集发现幼年组、青年组和中老年组大鼠骨样本中DUSP1 m RNA表达量在不同骨折时间点差异显著。并且随着大鼠骨折愈合进程的推进呈现先升后降的波动变化趋势。2.综合3个mi RNA数据库预测结果得到6个靶向DUSP1 m RNA的mi RNA,分别为rno-mi R-101a-3p、rno-mi R-101b-3p、rno-mi R-137-3p、rno-mi R-429、rno-mi R-200c-3p和rno-mi R-200b-3p。3.淫羊藿苷(浓度为10μg/m L)能够显著提升大鼠BMSCs增殖活性、ALP活性和成骨标志基因OCN、OSX的表达。4.淫羊藿苷能够抑制大鼠BMSCs中rno-mi R-200c-3p表达,并促进DUSP1蛋白表达。5.双荧光素酶报告实验验证rno-mi R-200c-3p能够与DUSP1 m RNA特异性结合。6.过表达rno-mi R-200c-3p的大鼠BMSCs中DUSP1 m RNA和蛋白表达量均降低。结论:淫羊藿苷通过抑制大鼠BMSCs中rno-mi R-200c-3p的表达从而提升DUSP1的表达,促进大鼠BMSCs的增殖和成骨分化,可能在促进骨折愈合过程中发挥作用。