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原发性肝癌在全球癌症致死率中高居第二,肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)占原发性肝癌的90%,具有较强的增殖、侵袭及转移等恶性生物学行为,总体生存率较低。肝细胞性肝癌发病机制复杂,分子靶向治疗效果不显著,寻找新的治疗靶点为最近研究的热点。磷酸化是蛋白质最重要、最常见的一种翻译后修饰,在生命活动中起着重要的调控作用。蛋白质的磷酸化由蛋白质激酶催化完成,其逆转过程是由蛋白质磷酸酶催化的,称为蛋白质去磷酸化。磷酸化和去磷酸化是一可逆的动态过程,是调控生化和生物学过程的重要方式,包括细胞增殖、凋亡、分化和肿瘤发生等,动态平衡的破坏会导致许多疾病的发生。已经报道的文献中,磷酸化和去磷酸化可以影响肝细胞性肝癌的癌细胞周期[1]、细胞凋亡[2]、肿瘤进展[3]、肝细胞性肝癌中血管形成[4]、影响肿瘤细胞对靶向药物的敏感性[5]以及肿瘤复发[6]等。由于磷酸组氨酸的不稳定性及检测手段的限制,真正鉴定的含磷酸组氨酸的蛋白质很少,关于组氨酸磷酸酶的研究和报道也较少,组氨酸磷酸化在哺乳动物中的作用在很大程度上仍未知。目前已知的哺乳动物组氨酸蛋白激酶为核苷二磷酸激酶1(NME1)和核苷二磷酸激酶2(NME2);已经报道的组氨酸磷酸酶有三种:14k Da磷酸组氨酸磷酸酶(PHPT1/PHP14)、磷酸肌氨酸磷酸组氨酸无机焦磷酸磷酸酶(LHPP)及磷酸甘油酸变位酶家族5(PGAM5)。PHP14参与肝脏星状细胞的迁移和片状伪足形成、神经元信号传导及影响胰腺β细胞的功能,在肝细胞性肝癌及肺癌中可能参与细胞的增殖。目前关于组氨酸磷酸酶LHPP的报道较少,最近其被证实为一种肿瘤抑制因子。Hindupur SK等在小鼠L-d KO肝细胞性肝癌模型中发现组氨酸磷酸酶LHPP表达明显下调,而持续的组氨酸磷酸酶LHPP表达可降低肿瘤负荷并保护小鼠肝细胞功能;通过在CB1、SNU449细胞中过表达组氨酸磷酸酶LHPP,发现其可抑制细胞增殖,证实组氨酸磷酸酶LHPP为一种肿瘤抑制蛋白;实验中应用2例人肝细胞性肝癌标本行免疫组织化学测验,结果示组氨酸磷酸酶LHPP在肝细胞性肝癌中表达降低;Hindupur SK等在实验中发现组氨酸磷酸酶LHPP在小鼠肝脏内的表达是非依赖m TOR途径的,并推测组氨酸磷酸酶LHPP减少及导致的组氨酸磷酸化增强是致癌的。郑江丽等报道组氨酸磷酸酶LHPP可通过激活AKT使Caspse-3和PARP磷酸化失活,抑制人宫颈癌细胞凋亡;过表达组氨酸磷酸酶LHPP能够减少P53信号通路相关的细胞的增殖、迁移及侵袭。目的:目前尚无关于组氨酸磷酸酶LHPP在人类肝细胞性肝癌样本中免疫组织化学表达特点的分析报道,本研究通过比较组氨酸磷酸酶LHPP在肝细胞性肝癌及癌旁正常肝组织(距癌肿小于1厘米)中表达的差异性,总结组氨酸磷酸酶LHPP表达与临床病理因素的关系,探究其在肝细胞性肝癌中的临床病理意义。研究方法:本实验在中国医科大学伦理委员会批准下进行。共计151例肝细胞性肝癌组织标本,均为中国医科大学附属第一医院病理科2015-2018年外科手术存档病例。组织经10%中性福尔马林固定、石蜡包埋。患者术前无放化疗病史,无合并其它部位原发恶性肿瘤、无肝血吸虫病史。按照WHO分类标准判定诊断及其分化程度。将石蜡包埋的肝细胞性肝癌组织切4μm厚切片,在70℃烤片机烤3小时,进行免疫组织化学染色。制定评分系统:根据胞浆染色强度分:0分:不着色;1分:浅黄色;2分:棕黄色。根据观察的5个高倍镜视野(400倍)1000个癌细胞中阳性癌细胞占据的百分比分为:1分:≤25%癌细胞着色;2分:26%-75%癌细胞着色;3分:≥76%癌细胞着色;染色强度与癌细胞阳性百分比评分相乘:<4分为阴性;≥4分为阳性。利用SPSS 20.0软件进行统计学分析,运用卡方检验,以P<0.05为有统计学意义。结果:1.组氨酸磷酸酶LHPP在肝细胞性肝癌中表达增强。组氨酸磷酸酶LHPP在肝细胞性肝癌组织中的阳性表达率为78.8%(119/151),阳性信号主要出现在胞浆,在癌旁正常肝组织(距癌肿小于1厘米)中均为阴性。2.组氨酸磷酸酶LHPP表达与临床病理因素的关系2.1组氨酸磷酸酶LHPP在肝细胞性肝癌中的表达与肝细胞性肝癌的分化程度(P=0.002)、Ki-67指数(P=0.022)及患者血清甲胎蛋白水平(P=0.005)显著相关。2.2组氨酸磷酸酶LHPP在肝细胞性肝癌中的表达与患者性别、年龄、有无感染乙型肝炎病毒、有无合并肝硬化及肿瘤TNM分期无关。3.组氨磷酸酶LHPP与免疫组织化学AFP、GPC-3、Arginase-1在肝细胞性肝癌中的表达差异无统计学意义。结论:1.组氨酸磷酸酶LHPP在肝细胞性肝癌中表达增强。2.组氨酸磷酸酶LHPP在肝细胞性肝癌中的表达与肿瘤的分化程度、Ki-67指数、血清甲胎蛋白水平相关。3.组氨酸磷酸酶LHPP可能与肝细胞性肝癌的恶性生物学行为相关,推测其可能成为诊断和判断预后的新指标。