苹果梨发育贮藏期间角质结构组分的变化及其对Alternaria alternata侵染的影响

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植物表皮角质层是阻止病原物侵染的重要屏障,对病原物识别、侵染寄主具有重要调控作用。本研究以苹果梨为试材,采用扫描电镜、透射电镜和气相色谱-质谱联用技术(GC/MS),系统观察和分析果实发育期及贮藏期苹果梨角质层结构(厚度、表皮形态)和角质化学组分变化;同时通过体内(in vivo)和体外(in vitro)试验研究了角质化学组分变化对苹果梨采后主要致腐病原物A. alternata生长及角质酶产生的影响,并初步分析了角质组分变化对果实失水的影响。结果表明:1.苹果梨果皮角质层结构(厚度、表皮形态)在发育及贮藏期均发生了显著的变化。果实发育期间,花后30d角质层较薄,分布不均匀,花后60d角质膜逐渐完整,并在部分表皮细胞的垂周壁上形成了可见的角质栓,花后80~100d,果皮角质层进一步沉积变厚,并有少量进入皮下沉积,同时形成了大量的垂周壁,花后130d,表皮形成了蜡质晶体;果实贮藏期间表皮进一步形成了大量清晰的垂周壁角质栓,贮藏前期果实表皮覆有大量的蜡质晶体,随着贮藏时间的延长,贮藏200d时,角质层表面变得光滑,有大蜡质块形成。2.苹果梨果皮角质组分在发育及贮藏期也存在差异。发育期苹果梨果皮角质提取物中共检测到脂肪酸、醇类、醛类、烷烃类和二酸类等五大类物质,其中脂肪酸含量占绝对优势,其含量随着发育期的延长而增加,花后130d其含量高达275ug/cm2。且果皮角质化学组分碳链长度范围为C9~C24,并且呈现明显的偶数碳优势,其中主要为C16、C18、C20和C22,C18绝对含量最高,C22次之。主要角质单体10,16-二羟基-十六烷酸、9,10,18-三羟基-十八烷酸随着发育期的延长呈现不断上升的趋势,而二十二烷二烯酸含量则不断下降。发育期角质脂肪酸的饱和度也发生了变化,饱和脂肪酸含量不断升高而不饱和脂肪酸含量不断减少。贮藏期共检测到脂肪酸、烷烃类和二酸类等三大类物质,其中脂肪酸含量也占绝对优势且其含量随着贮藏期的延长而增加,贮藏200d时其含量高达495ug/cm-2。贮藏期主要角质单体10,16-二羟基-十六烷酸、9,10,18-三羟基-十八烷酸、18-羟基-油酸、18-羟基-9,10-环氧-十八烷酸的含量均呈现不断上升的趋势。角质化学组分碳链长度分布与发育期的相同。3.果实表皮角质提取物对A. alternata菌丝生长和孢子萌发的均有一定的抑制作用,但没有明显的变化规律。A. alternata在侵染苹果梨时能产生角质酶,在侵染后第4d后大量产生,第8d其活性高达10u/ml。体外研究表明A. alternata角质酶能被苹果梨角质层组分诱导。4.随着发育及贮藏期的延长,果实失水率呈降低趋势,并且失水率与角质组分22:02显著的正相关,与C18和Epoxy w-OH呈显著的负相关,与16:0Di-OH、18:0Tri-OH和16:0w-OH呈负相关。综上所述,苹果梨表皮角质层结构和角质组分随果实的发育贮藏而变化,进而影响A. alternata的侵染及水分散失,但具体的调控机理仍需进一步研究。
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