大豆组织特异型启动子表达特性分析

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大豆是重要的粮油兼用作物,世界各地均有种植。大豆种子中含有丰富的脂肪、植物蛋白以及营养物质。但是大豆的生长环境使其经常面临病原体、害虫等生物胁迫和高温、干旱等非生物胁迫的侵害,生长发育受到严重影响,从而导致大豆产量下降和品质恶化,因此需要有效且经济的方法来改良大豆品种。大豆的基因组比较大,调控基因表达的机制复杂,随着越来越多的抗病基因被发现,对启动子等基因表达调控元件的研究也刻不容缓。但是目前转基因技术常用的启动子大多为组成型表达的启动子,这可能在转基因植株中引起额外的代谢负担或毒性效应。因此,为了对基因的时空表达进行更深入的研究,就需要能够指导目的基因在特定的组织和器官中表达的组织特异型启动子。本研究通过已发表的大豆转录组数据筛选组织特异表达的基因,并在大豆全基因组信息数据库中查找基因上游的启动子序列,从大豆品种Williams 82中克隆启动子序列并构建了启动子驱动GUS基因的表达载体,通过农杆菌介导法侵染转化拟南芥得到阳性植株,并用GUS染色及RT-PCR验证启动子的表达模式。同时用转入了组织特异启动子GUS表达载体的发根农杆菌转化大豆,获得毛状根,用GUS染色验证启动子在大豆毛状根中的表达情况。本实验获得了2个叶特异表达的启动子和8个根特异表达的启动子,并分别在拟南芥阳性植株和大豆毛状根中验证了它们的表达模式。
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