【摘 要】
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本课题应用RNAi(RNA interference)技术修饰骨髓源树突状细胞,通过抑制其CD80、CD86表达以阻断B7/CD28共刺激通路,探讨其对T淋巴细胞增殖的影响及机理;研究经RNAi敲减CD80、C
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本课题应用RNAi(RNA interference)技术修饰骨髓源树突状细胞,通过抑制其CD80、CD86表达以阻断B7/CD28共刺激通路,探讨其对T淋巴细胞增殖的影响及机理;研究经RNAi敲减CD80、CD86后的供体来源树突状细胞在小鼠同种异体节段性小肠移植中对移植物的保护作用及机制。 第一部分RNAi敲减树突状细胞CD80、CD86表达的体外实验研究 目的:探讨RNAi对DC表面抗原CD80、CD86表达的影响及siRNA干扰DC对T淋巴细胞增殖的影响及机理。方法:采用培养基选择法体外培养小鼠骨髓源DC;经体外转录合成针对CD80、CD86mRNA序列特异性siRNA,转染DC;半定量RT-PCR、流式细胞仪检测转染前后CD80、CD86分子mRNA表达水平以及细胞表面抗原CD80、CD86、MHCⅡ、CD11c表达情况;混合淋巴细胞培养观察siRNA干扰DC刺激T淋巴细胞增殖能力的变化。结果:每只小鼠平均可获1.5-2×10~7个骨髓源DC;siRNA转染DC后,CD80、CD86分子mRNA表达水平明显减低,细胞表面抗原CD80、CD86阳性率由85.85%,
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