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表皮葡萄球菌(表葡菌)是人体皮肽和粘膜上定居的正常菌群之,通常情况下致病力很低。近几年来,随着留置静脉导管等侵袭性操作的增多,表葡菌已成为医院感染的重要致病菌,研究认为生物膜对于表皮葡萄球菌感染十分重要。
在前期的工作中,我们构建了sara基因缺失的S.epidermidisRP62AAsara菌株,发现对形成生物膜十分重要的icaADBC操纵子的表达受到sara(staphylococcalaccessoryregulatorA)基因的正调控,显示sara对于生物膜形成十分重要,同时证实了sara对于表皮葡萄球菌抗生素抗性有着重要作用.
在表皮葡萄球菌中,脂肪酶对于细菌利用脂肪生存十分重要;自溶酶参与生物膜形成,能够降解细胞壁的肽聚糖成分,并且通过非共价结合参与表皮葡萄球菌和多聚材料的粘附,从而形成生物膜;膜相关锌会属蛋白酶对于细菌的侵袭和转移有着重要的作用。本文利用RT一PCR方法和Latz报告基因系统,证实了表皮葡萄球菌中sara基因对自溶酶基因(atlE),脂肪酶基因(liipA)和膜相关锌金属蛋白酶基因(zinC)的表达分别具有直接的抑制作用,促进作用和促进作用。研究了葡萄糖浓度对于RP62AAsara和RP62A两株菌生长情况,生物膜形成能力和抗生素抗性的作用,推测sara基因可能参与了萄糖对于生物膜形成和抗生素抗性的调控。
分别使用Clustalx软件进行核苷酸和氨基酸序列比对,利用Sw/ss—Model进行蛋白模拟,观察到表皮葡萄球菌sara基因和蛋白与金黄色葡萄球菌的sara基因和蛋白具有高度同源性,分别为82﹪和86﹪。在金黄色葡萄球菌中sarA基因是一个全局性调控因子,可以通过直接或者问接方式调控众多毒性因子的表达,直接调控是通过蛋白与DNA结合实现的。结合已有的关于表皮葡萄球芮SaraA蛋白直接调控ica操纵子的报道,我们认为这种直接洲控是通过蛋白和DNA结合的方式实现的,州预测结合的热点为AT富集区域。