【摘 要】
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目的探究自拟五轮润燥养眼方对雌性C57BL/6小鼠干眼模型的治疗作用。材料与方法本实验采用智能干燥环境控制系统结合注射药物东莨菪碱诱导建立小鼠燥热阴虚证干眼模型。筛选体重范围在18-22g的健康8周龄C57/BL6雌性小鼠30只,每只小鼠均进行一般的健康检查和眼科项目检查(眼周、结膜、虹膜、角膜、晶状体、视盘及眼底血管),泪液分泌量检测(SIT)、角膜荧光素钠染色实验(FL),保证参与实验的30只
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目的探究自拟五轮润燥养眼方对雌性C57BL/6小鼠干眼模型的治疗作用。材料与方法本实验采用智能干燥环境控制系统结合注射药物东莨菪碱诱导建立小鼠燥热阴虚证干眼模型。筛选体重范围在18-22g的健康8周龄C57/BL6雌性小鼠30只,每只小鼠均进行一般的健康检查和眼科项目检查(眼周、结膜、虹膜、角膜、晶状体、视盘及眼底血管),泪液分泌量检测(SIT)、角膜荧光素钠染色实验(FL),保证参与实验的30只小鼠角膜屏障功能良好,眼前节正常。将参与实验的30只小鼠随机分为空白对照组(K)、模型对照组(M)、Cs A阳性药组(Y)、自拟五轮润燥养眼方低剂量组(D)、自拟五轮润燥养眼方中剂量组(Z)、自拟五轮润燥养眼方高剂量组(G),每组各5只。空白对照组小鼠饲养于正常环境中(RH:60%-80%;T=21-23°C),其余各组小鼠饲养于智能干燥箱内2周(RH=15±3%;WV=2.1±0.2m/s;T=21-23°C),并同时给予皮下注射药物东莨菪碱,每日3次,每次剂量为0.5mg/0.3ml。造模第一天开始给药,造模周期为14天。自拟五轮润燥养眼方各剂量组按照一定比例(低剂量:中剂量:高剂量=0.5:1:2)灌胃给药,每日2次,每次0.2ml。Cs A阳性药组应用0.05%的环孢菌素A滴眼,每日2次。在第0天、7天、14天,对各组模型小鼠进行角膜上皮损伤检测(FL)、泪液分泌量检测(SIT)。在第14天检测后,将全部小鼠双侧眼球及眼睑附属器组织进行切除,检测结膜杯状细胞密度,角膜厚度,角膜上皮细胞凋亡,结膜穹隆杯状细胞凋亡情况。结果1.泪液分泌量(SIT)检测结果:造模14天后阳性药组(Y)、自拟五轮润燥养眼方高浓度组(G)、自拟五轮润燥养眼中剂量组(Z)较模型对照组(M)泪液分泌量显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。2.角膜荧光素钠染色检测结果:造模14天后自拟五轮润燥养眼方高剂量组(G)、自拟五轮润燥养眼方中剂量组(Z)较模型对照组(M)泪液分泌量显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。自拟五轮润燥养眼方低剂量组(D)与模型对照组(M)相比无显著差异(P>0.05)。3.角膜厚度测量结果:自拟五轮润燥养眼方高剂量组(G)和中剂量组(Z)与模型对照组(M)相比,角膜厚度明显更厚,数据差异具有统计学意义(P<0.05)。自拟五轮润燥养眼方低剂量组(D)与模型对照组(M)相比无显著差异(P>0.05)。4.结膜杯状细胞密度测量:自拟五轮润燥养眼方高剂量组(G)、中剂量组(Z)与模型对照组(M)相比,结膜杯状细胞明显增加,数据差异具有统计学意义(P<0.05);自拟五轮润燥养眼方低剂量组(Z)与模型对照组(M)比较无明显改善,数据间无显著性差异(P>0.05)。5.角膜上皮细胞凋亡检测:自拟五轮润燥养眼方高剂量组(G)与模型对照组(M)相比,角膜上皮的凋亡细胞有显著性减少,数据差异具有统计学意义(P<0.05);自拟五轮润燥养眼方中剂量组(Z)、低剂量组(D)与模型对照组(M)比较无明显改善,数据间无显著性差异(P>0.05)。6.结膜穹隆杯状细胞凋亡检测:自拟五轮润燥养眼方高剂量组(G)、中剂量组(Z)与模型对照组(M)相比,结膜上皮的凋亡细胞有极显著性减少,数据差异具有统计学意义(P<0.05);自拟五轮润燥养眼方低剂量组(D)与模型对照组(M)比较无明显改善,数据间无显著性差异(P>0.05)。结论1.采用智能干燥环境控制系统结合注射药物东莨菪碱诱导建立小鼠干眼模型,具有成功率高、造模周期短、操作简便易行等特点。2.自拟五轮润燥养眼方可以缓解干眼症状,增加泪液分泌量(SIT),降低角膜损伤程度,对角膜上皮细胞、结膜杯状细胞均有保护作用。3.自拟五轮润燥养眼方对干眼模型小鼠的作用机制,是通过抑制角、结膜上皮组织中的细胞凋亡来减轻角膜上皮损伤,保护角膜上皮细胞、结膜杯状细胞而实现的。4.自拟五轮润燥养眼方高、中、低剂量组对干眼模型小鼠均有治疗作用,其中高剂量组治疗效果更明显。
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